黑水虻预蛹蛋白的提取及羟基自由基清除活性研究

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黑水虻,拉丁学名Hermetia illucens,是一种世界性广泛分布的昆虫资源。本研究以黑水虻预蛹的全脂粉,脱脂粉,匀浆液,除杂匀浆液为材料,提取了粗蛋白和组分蛋白,测定了提取物的蛋白含量及清除羟基自由基的活性,以期为黑水虻预蛹蛋白的开发提供基础资料。主要研究结果如下:  1.提取剂和样品的脱脂处理影响粗蛋白的提取量和清除羟基自由基的活性。从全脂预蛹粉、脱脂预蛹粉、预蛹匀浆液、除杂过的预蛹匀浆液等样品中提取粗蛋白时,稀NaOH提取物的粗蛋白含量显著高于其它提取物的蛋白含量,从全脂预蛹粉和脱脂预蛹粉中提取粗蛋白时,稀NaOH提取物的蛋白含量达到其它溶液提取物的3倍以上。提取剂相同时,脱脂预蛹粉中提取的粗蛋白含量最高。用5% NaCl提取的脱脂预蛹粉粗蛋白含量是全脂预蛹粉中的 1.5 倍。超纯水提取的粗蛋白对羟基自由基的清除率显著高于其它粗蛋白样品,蛋白浓度为10μg/mL时,全脂预蛹粉的水提粗蛋白对羟基自由基的清除率可达 40.8%;在脱脂预蛹粉的水提取物中蛋白对羟基自由基的清除率为23.4%,是其它溶液提取物蛋白的1.7~7.5倍。全脂预蛹粉中的粗蛋白清除羟基自由基的活性最高,5% NaCl作提取剂时,全脂预蛹粉粗蛋白清除羟基自由基的活性是脱脂预蛹粉中的1.2倍。  2.比较了四种提取剂在 9 个不同温度下提取的粗蛋白的含量和清除羟基自由基的活性。发现,在5℃下提取蛋白含量显著高于在其它温度下。1g脱脂预蛹粉中可以提取出317 mg粗蛋白,提取率可达31.7%。在25℃时用水提取全脂预蛹粉,此时得到的粗蛋白清除羟基自由基的活性最高,在蛋白浓度为10μg/mL时,清除率可达到41%。  3.从全脂预蛹粉和脱脂预蛹粉中提取清蛋白、碱溶蛋白、小分子肽、球蛋白、醇溶蛋白等组分蛋白时,温度影响较大,但35℃均较好。在该温度下,从脱脂预蛹粉提取得到的小分子肽和从全脂预蛹粉提取得到的醇溶蛋白,清除羟基自由基的活性最高,在蛋白浓度为20 μg/mL时,清除率可达到42%-47%。在45℃下脱脂预蛹粉中提取的碱溶蛋白含量最高,1 g脱脂预蛹粉可提取出315 mg碱溶蛋白。全脂预蛹粉中提取的球蛋白对羟基自由基清除率显著高于脱脂预蛹粉中提取的,蛋白样品浓度为20μg/mL时,清除率为33%。  本研究通过对黑水虻预蛹蛋白的提取及羟基自由基清除活性研究,建立并优化了黑水虻预蛹中能清除羟基自由基活性蛋白的提取方法,本研究结果为黑水虻预蛹蛋白的开发提供了科学依据。
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