多囊卵巢综合征卵泡发育障碍及滋阴补阳中药序贯干预的机理研究

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目的:通过研究滋阴补阳中药序贯对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞(GC)分泌功能和细胞因子基因表达的调控,以及滋阴补阳中药序贯对PCOS不孕患者促排卵周期、体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中血清、卵泡液中干细胞因子(SCF)水平的影响及其与优势卵泡、卵细胞质量的关系,探讨滋阴补阳中药序贯对PCOS干预的作用机理。方法:1.实验研究:将造模成功的PCOS大鼠,按实验要求分离与培养卵巢颗粒细胞,并制备空白血清、滋阴方、补阳方含药血清,观察滋阴方、补阳方对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞分泌E2、P功能的影响,以及对干细胞因子(SCF)、雄激素受体(AR)、类固醇合成急性调控蛋白(StAR)基因表达调控的影响。2.临床研究:选取PCOS患者60例,其中经典PCOS30例,无高雄PCOS30例;并选取非PCOS患者30例作为正常组对照,分析基础状态下SCF与PCOS发病机制的相关性。另选取62例行促排卵治疗的PCOS患者随机分为2组,治疗组(滋阴补阳中药序贯/克罗米芬(CC)/果纳芬(r-FSH),30个周期)和对照组(CC/r-FSH,32个周期)。观察两组患者HCG注射天数、子宫内膜厚度、优势卵泡个数、HCG日血清E2、LH、SCF水平、比较两组在排卵率、妊娠率、卵巢过度刺激综合征(OHSS)以及卵泡未破裂黄素化综合征(LUFS)等方面的效果。40例将行IVF-ET的PCOS患者随机分为2组,治疗组(滋阴补阳中药序贯联合西药组)和对照组(西药组),每组各20例。观察两组患者HCG日血清E2、LH、P水平、取卵日卵泡液中SCF水平以及取卵个数、受精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠率。结果:1.造模后,PCOS大鼠卵巢大体解剖以及HE染色后卵巢光镜均有明显不同。2.卵泡期中,滋阴方10%、20%组均可有效提高PCOS大鼠颗粒细胞上清液中的E2、SCF含量;黄体期中,补阳方10%组刺激黄素化颗粒细胞分泌P的作用最强。当补阳方浓度继续增大,其促进P分泌的作用并没有增强。3.模型组PCOS大鼠颗粒细胞分泌E2、P水平显著降低。10%、20%滋阴方、20%补阳方均可有效促进PCOS大鼠卵巢颗粒细胞分泌E2、P,滋阴方的浓度与颗粒细胞分泌E2、P成一定的量效关系。4.模型组大鼠卵巢GC中ARmRNA表达显著升高,SCF、StARmRNA表达显著降低。10%、20%滋阴方组、20%补阳方组可有效下调ARmRNA表达,上调SCF、StARmRNA表达。5.无高雄PCOS AFC明显多于经典PCOS组、正常组。无高雄PCOS组与正常组T水平显著低于经典PCOS组。无高雄PCOS组血清SCF水平明显升高。无高雄PCOS组SCF水平与AFC呈正相关。6.PCOS患者促排卵治疗后,试验组治愈率36.7%,总有效率86.7%;对照组治愈率12.5%,总有效率87.5%,两组治愈率有显著差异。试验组HCG日子宫内膜厚度、HCG日≥14mm卵泡数、HCG日≥18mm卵泡数均有显著差异。试验组HCG日血清E2、SCF明显高于对照组。7. IVF-ET周期治疗组取卵日卵泡液中SCF水平、受精率、优质胚胎率明显高于对照组。妊娠组取卵日卵泡液SCF水平显著高于未妊娠组。结论:1.SCF与PCOS卵泡发育障碍的发病机制相关。2.滋阴、补阳方可明显改善PCOS大鼠卵巢颗粒细胞分泌功能,下调AR基因表达,上调SCF、StAR基因表达。3.滋阴补阳中药序贯联合西药促排卵可以增加子宫内膜厚度及HCG日E2、SCF水平,提高妊娠率。4.对PCOS患者IVF-ET中进行滋阴补阳中药序贯干预,可改善卵巢内微环境,提高卵泡液内SCF水平,从而提高受精率、优质胚胎率、妊娠率。
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