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应激（stress）一词是由Han Salye在20世纪30年代提出的,它指机体在受到剧烈外界刺激后由神经、内分泌及免疫系统等多方面共同协作表现出来的一种反馈模式[1]。应激性精神障碍临床表现为意识障碍、抑郁、焦虑、偏执及对应激源反应过度、恐惧等,是包括抑郁障碍、焦虑障碍和创伤及应激相关障碍在内以应激为主要诱因的一类疾病的总称。本研究拟针对应激性精神障碍中最为常见的创伤后应激障碍（post-traumatic stress disorder,PTSD）和抑郁障碍开展研究,分别评价了氯胺酮防治PTSD的作用与机制、肉豆蔻醚抗抑郁作用与机制,旨在探究这二者作为新型抗PTSD药和抗抑郁药的可行性,并明确其药理作用特点及机制。一、氯胺酮防治创伤后应激障碍的药理作用及机制研究氯胺酮是非竞争性谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartic acid,NMDA）受体拮抗剂,大量的科学研究显示氯胺酮具有快速抗抑郁作用,其光学异构体盐酸艾司氯胺酮鼻喷剂已于2019年3月5日在美国获批上市,使得抗抑郁药物研究取得了突破性进展。由于抑郁症和PTSD具有高共患病率和相似的治疗药物,近年来氯胺酮对PTSD是否具有防治作用也引起了研究者的广泛兴趣。遗憾的是,迄今为止氯胺酮对创伤后应激障碍是否具有治疗作用并未取得一致性结论,对于氯胺酮的给药时机以及作用持续时间等也缺乏系统性的研究,因此深入研究氯胺酮防治PTSD的作用和机制具有重要意义。实验目的本论文旨在评价氯胺酮单次给药对PTSD模型动物条件性恐惧的形成、表达、消退及消退保持的影响,并基于源于大脑的神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）表达调节来研究其作用机制,为扩大氯胺酮的临床应用和阐明氯胺酮的药理作用特点提供实验依据。实验方法基于以上研究目的,我们采用经典的小鼠条件性恐惧模型和大鼠时间依赖敏感化（time dependent sensitization,TDS）,评价氯胺酮单次给药对大、小鼠场景恐惧和声音线索恐惧行为和BDNF表达的影响,明确氯胺酮药理作用特点（起效剂量、起效时程、持续时间）和作用机制（作用于恐惧记忆的哪个阶段发挥作用、是否通过调节BDNF表达发挥作用）。实验结果小鼠条件性恐惧模型研究结果表明:（1）恐惧训练前不同时间点（训练前7 d、24 h或0.5 h）单次（腹腔注射,i.p.）氯胺酮10 mg·kg-1,对小鼠恐惧形成、训练后24 h小鼠场景恐惧和声音线索恐惧的表达均无显著影响;（2）恐惧训练前0.5 h单次预防性i.p.不同剂量氯胺酮3 mg·kg-1或10 mg·kg-1对恐惧记忆形成无影响,氯胺酮10 mg·kg-1单次i.p.对恐惧训练后第7天的声音线索恐惧表达和第14天的场景恐惧表达具有显著抑制作用;（3）在恐惧训练后立即单次i.p.氯胺酮10 mg·kg-1对恐惧记忆的表达无显著影响;（4）在恐惧表达测试前0.5 h单次i.p.氯胺酮10mg·kg-1对线索恐惧记忆表达无显著影响;（5）在恐惧记忆的不同阶段（电击训练前、电击训练后、消退训练前、消退训练后）单次i.p.氯胺酮10 mg·kg-1对线索恐惧的消退及消退保持无显著影响;（6）恐惧训练前0.5 h单次i.p.氯胺酮10 mg·kg-1,在训练后24 h和14 d两个时间点均可显著逆转恐惧所致的皮层BDNF表达降低。大鼠TDS模型研究结果表明:恐惧训练前0.5h、24 h单次i.p.氯胺酮给10 mg·kg-1,分别对24 h后的场景恐惧表达和声音线索恐惧表达有显著抑制作用。二、肉豆蔻醚抗抑郁作用及机制研究在我国现有的抑郁症治疗中,化药处于主导地位,但是由于长期服用此类药物会出现严重的不良反应,因此从副作用较小的中药复方和天然产物中寻找和研制理想的抗抑郁剂成为了当下研究者们关注的重点。肉豆蔻是肉豆蔻科植物,肉豆蔻的干燥成熟种仁,具有广泛的药理作用,其药效可止腹泻、保护肝脏、消除增生、助眠等。肉豆蔻具有较强的中枢活性,超剂量使用具有致幻作用。研究表明肉豆蔻提取物可能具有抗抑郁作用,作用机制尚无明确报道。肉豆蔻醚是肉豆蔻挥发油的主要成分,体外研究表明其具有中度的单胺氧化酶活性,其是否具有抗抑郁作用尚无报道。实验目的本论文旨在评价肉豆蔻醚的抗抑郁作用及快速起效的作用特点,采用传统药理学方法评价其作用机制是否与激活5-羟色胺（5-Hydrozytryptamine,5-HT）系统、去甲肾上腺素系统（Norepinephrine,NE）、谷氨酸（Glutamic acid,Glu）系统、阿片（Opium）系统、大麻素（Cannabinoid）系统有关。实验方法基于以上研究目的,本研究采用多种抑郁症动物模型,包括行为绝望模型、慢性应激模型和利血平模型对肉豆蔻醚的抗抑郁作用和特点进行评价;进而采用多种药物拮抗模型,包括对氯苯丙氨酸（p-chloropheny lalanine,PCPA）耗竭5-HT实验、5-羟色氨酸（5-hydroxy-L-tryptophan,5-HTP）诱导甩头实验、育亨宾毒性增强实验、WAY100635拮抗5-HT1A受体实验、NBQX拮抗α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸（α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid,AMPA）受体实验、纳洛酮拮抗阿片实验、AM251拮抗大麻素受体CB1受体实验、AM630拮抗大麻素受体CB2受体实验分别评价肉豆蔻醚对5-HT系统、NE系统、5-HT1A受体、AMPA受体、阿片系统、大麻素系统的影响。实验结果肉豆蔻醚抗抑郁作用研究结果:（1）在小鼠行为绝望模型中,肉豆蔻醚3 mg·kg-1、10 mg·kg-1单次i.p.或（灌胃i.g.）给药可显著降低小鼠悬尾或游泳的不动时间;（2）小鼠自发活动实验结果表明,肉豆蔻醚抗抑郁有效剂量下对小鼠自发活动无显著影响;（3）在小剂量利血平致小鼠抑郁模型中,连续两周i.g.肉豆蔻醚3 mg·kg-1、10 mg·kg-1可显著逆转利血平化小鼠悬尾或游泳不动时间的延长。肉豆蔻醚快速起效抗抑郁作用特点研究结果:（1）肉豆蔻醚3 mg·kg-1和氯胺酮10mg·kg-1单次i.p.给药可显著缩短0.5 h和24 h小鼠悬尾或游泳不动时间,而度洛西汀只对0.5 h不动时间有抑制作用;（2）在利血平致小鼠抑郁模型中,肉豆蔻醚3 mg·kg-1和氯胺酮10 mg·kg-1单次i.p.给药可显著升高利血平化小鼠蔗糖偏嗜度;（3）在小鼠慢性应激模型中,肉豆蔻醚3 mg·kg-1和氯胺酮10 mg·kg-1单次i.p.给药后,慢性应激模型小鼠蔗糖偏嗜度分别增加了68%和72%,但无统计学差异。肉豆蔻醚抗抑郁机制研究结果:（1）在PCPA耗竭5-HT实验中,肉豆蔻醚3 mg·kg-1在小鼠悬尾和强迫游泳实验中的抗抑郁作用可被PC PA完全取消;（2）在5-HTP诱导的小鼠甩头实验中,肉豆蔻醚单次i.p.可剂量依赖性减少5-HTP诱导的小鼠甩头次数;（3）在育亨宾毒性试验中,肉豆蔻醚3 mg·kg-1对育亨宾引起的的小鼠死亡率无显著影响;（4）在WAY100635拮抗5-HT1A受体实验中,肉豆蔻醚3 mg·kg-1在小鼠强迫游泳实验中的抗抑郁作用可被WAY100635完全取消;（5）在N BQX拮抗AMPA受体实验中,NBQX对肉豆蔻醚3 mg·kg-1在小鼠悬尾和强迫游泳实验中的抗抑郁作用无拮抗作用;（6）在纳洛酮拮抗阿片受体实验中,肉豆蔻醚3 mg·kg-1在小鼠强迫游泳实验中的抗抑郁作用可被纳洛酮完全取消;（7）在AM251、AM630拮抗大麻素受体CB1、C B2实验中,肉豆蔻醚3 mg·kg-1在小鼠强迫游泳实验中的抗抑郁作用可被AM251、AM630完全取消。