针刺“百会透曲鬓”对急性脑出血大鼠GSK-3β表达影响的实验研究

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fairylky
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目的:通过针刺“百会透曲鬓”穴,观察此疗法对急性脑出血大鼠脑组织中GSK-3β的表达的影响,从而探究该针刺疗法对急性脑出血大鼠脑保护机制及可能的作用机理。方法:本实验共设空白组、模型组、针刺组和抑制剂组4组,而后三组再分别按Id、3d、7d、14d四个时间点分成四个亚组,以上共计13个组。将1 56只雄性Wistar-大鼠随机分到上述1 3个组内,每组12只。分组后,空白组不做处理;其余三组建立脑出血模型,并待大鼠苏醒后观察神经功能缺损情况,根据标准筛选出合格的模型进行下一步研究。模型组大鼠造模后在相应时间点直接取材;针刺组和抑制剂组大鼠经相应处理和治疗后,也在相应时间点取材。取材后,在显微镜下观察大鼠的脑组织形态学的改变情况。各组的12只大鼠中选取6只做免疫组化,6只做免疫印迹,分别观察大鼠脑组织中GSK-3β阳性细胞和蛋白的表达情况,进行统计分析。结果:1.光镜下的模型组大鼠脑组织样本可看到明显的出血灶,且周围的脑组织出现液化、水肿、坏死以及神经胶质细胞增生。上述表现在3d较严重,而后随时间延长而缓解,在14d上述表现基本回归正常。针刺组和抑制剂组大鼠脑组织的病理学改变与同时间点的模型组大鼠相比均有不同程度减轻。2.GSK-3β免疫印迹法检测的结果:模型组、抑制剂组以及针刺组大鼠脑组织GSK-3β蛋白数量的表达与在光镜下观察到的脑组织形态学改变的结果较一致:在3d有所下降,7d略微增加,14d又有所下降。其中相比模型组而言,针刺组疗效显著,有统计学意义(P<0.05);相比模型组而言,抑制剂组疗效亦显著,有统计学意义(P<0.05);针刺组与抑制剂组相比,其差异无统计学意义(P>0.05)。3.GSK-3β免疫组化法检测的结果:模型组、抑制剂组以及针刺组大鼠脑组织GSK-3β蛋白数量的表达与在光镜下观察到的脑组织形态学改变的结果较一致:在3d有所下降,7d略微增加,14d又有所下降。其中相比模型组而言,针刺组疗效显著,有统计学意义(P<0.05);相比模型组而言,抑制剂组疗效亦显著,有统计学意义(P<0.05);针刺组与抑制剂组相比,其差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.“百会透曲鬓”头针疗法能明显减轻脑出血急性期脑组织的病理学损伤,从而保护脑组织细胞。2.“百会透曲鬓”头针疗法可能通过抑制 GSK-3β的表达,从而改善GSK-3β对与其相关通路的抑制,进而促进脑神经细胞的增殖分化。
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