硫酸酯化黑木耳多糖辐射防护作用的研究

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随着经济的发展和生活水平的提高,中国核电事业在各个领域有所应用,如医疗、科技、工业等方面。然而,电离辐射不仅带来了巨大的好处,也给身体造成了极大的伤害。因此发掘天然抗氧化剂已成为当今的研究重点。本研究以黑木耳为研究对象,采用超声辅助热水法提取多糖,通过乙醇分级、体外抗氧化试验筛选出活性最高的多糖片段采用化学修饰方法制备硫酸酯化黑木耳多糖,并对硫酸酯化黑木耳多糖的结构及其抗辐射功能进行研究。采用超声辅助法提取黑木耳多糖的最佳工艺条件为:超声时间18 min,超声功率400 W,料液比1:138,最终黑木耳多糖得率为(34.67±0.32)%。与水提醇沉法多糖相比,超声辅助法提取得到的多糖抗氧化活性较强。经乙醇分级,体外抗氧化实验表明NAAP80的抗氧化活性最佳。采用氯磺酸-N,N二甲基甲酰胺法(CAS-DMF)修饰NAAP80,最佳工艺条件为:反应时间3 h,反应温度51.06℃,CAS-DMF试剂比为1:5.97,得到硫酸酯化黑木耳多糖(SNAAP),硫酸基取代度为0.514。SNAAP的红外光谱图显示,在1247.70cm-1和816.76cm-1处存在两个特征吸收峰,表明NAAP经CAS-DMF法修饰成功;通过紫外光谱分析,SNAAP中既不含有核酸也不含有蛋白质;通过HPLC图谱分析,SNAAP的相对分子量分布均一,且分布较窄;单糖组成结果表明,SNAAP是由甘露糖和葡萄糖组成,摩尔比率为1.7:1;扫描电镜图分析,SNAAP的表面形貌圆滑工整,呈不规则纤维丝状的堆积。通过建立小鼠体内60Co-γ辐射损伤模型,研究硫酸酯化黑木耳多糖的抗辐射作用。SNAAP能够改善60Co-γ辐射对小鼠造成的氧化损伤。通过三种途径发挥辐射防护作用:SNAAP能够增加小鼠体重,提高小鼠的器官指数,增加单核细胞吞噬能力及脾淋巴细胞转化能力,降低细胞因子IL-2、IL-12以及INF-γ的表达水平,改善小鼠的免疫系统;SNAAP可以显著提高小鼠血清中SOD、CAT、LDH的含量,提高GSH活性,降低MDA水平,提高抗氧化应激酶活性;SNAAP可以降低小鼠血清中羰基蛋白质含量,降低肌酐和尿素氮的水平,对小鼠肾脏的代谢能力起到有效的辐射防护作用。
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