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目的:肝脏细胞的脂肪变性是影响肝脏功能的重要病变之一,其导致的脂肪肝主要特征是肝脏内脂肪堆积过多引起的病变,是一种常见的肝脏病理改变,严重会导致肝脏功能及全身各系统功能紊乱等疾病。维生素D作为脂溶性维生素之一,它对人体健康的积极影响作用已经从多方面得到了证实,其对机体脂质代谢的影响也有很多研究证实。本实验旨在研究维生素D对HepG2细胞的脂质累积的影响,进而为进一步探讨和研究其机制提供基础。研究方法:研究对象是人肝癌细胞（HepG2）细胞系,实验分为空白对照组（CON组）、给予活性维生素D(Calcitriol,终浓度2×10-8mol/L)处理组（VD组）、油酸处理组（OA组）、活性维生素D和油酸共同处理组（OA+VD组）,通过试剂盒检测细胞裂解液中谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）水平、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、葡萄糖（GLU）的相对含量。通过油红O染色观察HepG2细胞中脂滴的变化及脂质沉积情况,通过RT-qPCR方法检测HepG2细胞中VDR、PPARγ、CD36、MTTP、PGC-1α的mRNA的表达。利用Western Blot、免疫组化、免疫荧光等方法检测Hep G2细胞CD36、PPARγ、PGC-1α、MTTP蛋白表达水平。结果:在给予油酸和活性维生素D处理后,1、在油酸的诱导下,HepG2细胞内总胆固醇、甘油三酯、葡萄糖的含量均显著升高,同时在OA+VD处理组,TC和TG的含量较单纯给予油酸组升高更明显,且结果有统计学意义,但GLU的含量较单纯给予油酸组并未升高,反而略有下降,结果无统计学意义。2、通过油红O染色,可以直观的看到,与CON组相比,经油酸和活性维生素D处理后的细胞内脂滴量明显增加,且脂滴量的增加与活性维生素D的浓度呈正相关。通过对油红O染色情况进行定量分析,得到油酸和活性维生素D处理的细胞内脂滴量显著增加,差异有统计学意义。在单独给予油酸处理时,随着时间的增加细胞内脂滴量也随之增加;在同样条件下增添活性维生素D处理会使细胞内脂滴量继续增多,且与时间呈正相关。通过对油红O染色进行定量分析,得出经油酸和活性维生素D处理的细胞内脂滴量随时间的增加而增加,且经过量化比较,处理24h（hours）的细胞内脂滴量最多。3、与CON组相比,OA组的CD36、PPARγ、PGC-1α的蛋白和mRNA表达明显增多,而OA+VD组的CD36、PPARγ、PGC-1α蛋白和mRNA的表达较OA组也有明显的增多,差异均具有统计学意义,而与CON组相比,OA组的MTTP蛋白表达减少,mRNA的下调并不明显,而OA+VD组细胞中的MTTP的蛋白和mRNA水平下调更加明显。4、与CON组相比,OA组AST升高明显,而OA+VD组AST下降明显,差异有统计学意义;但同样处理因素的四组对ALT的影响并不明显,差异无统计学意义。结论:1、活性维生素D（Calcitriol）能增加HepG2细胞内VDR的表达,且对肝细胞肝功可能存在保护作用;2、活性维生素D能使进入HepG2细胞的脂肪酸增多,引起脂质累积;3、活性维生素D能促进HepG2细胞内CD36、PPARγ和PGC-1α的表达,使摄入Hep G2细胞的脂肪酸增多,并沉积下来,促进脂质合成;4、活性维生素D会下调HepG2细胞内MTTP的表达,这可能会减少脂质转运出肝细胞,造成细胞内脂质累积增多。综上所述,本研究显示维生素D增加了油酸诱导的HepG2细胞内脂质的沉积。