【摘 要】
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目的:在膝骨关节炎（KOA）的发生发展进程中,促炎因子发挥着举足轻重的作用,但是尚不清楚其发病机理中涉及的特定靶标因子。本研究旨在观察不同病变程度的KOA关节软骨中白细胞介素-15（IL-15）在基因水平和蛋白水平的表达,并分析其表达与关节软骨退变程度及X线分级的相关性。方法:收集行全膝关节置换术或膝关节单髁置换术的KOA患者的膝关节软骨标本,共30例患者满足我们的纳入要求,根据患者手术之前的X片
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目的:在膝骨关节炎（KOA）的发生发展进程中,促炎因子发挥着举足轻重的作用,但是尚不清楚其发病机理中涉及的特定靶标因子。本研究旨在观察不同病变程度的KOA关节软骨中白细胞介素-15（IL-15）在基因水平和蛋白水平的表达,并分析其表达与关节软骨退变程度及X线分级的相关性。方法:收集行全膝关节置换术或膝关节单髁置换术的KOA患者的膝关节软骨标本,共30例患者满足我们的纳入要求,根据患者手术之前的X片将30例患者按K-L分级标准分为3组:轻度组（K-LⅡ级）组8例;中度组（K-LⅢ级组）10例;重度组（K-LⅣ级）组12例。首先对收集到的膝关节软骨标本进行切片和苏木精-伊红（HE）染色,然后对KOA关节软骨的病理学改变进行镜下评估,对各组标本的关节软骨退变程度进行Mankin病理评分。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法检测各组膝关节软骨中IL-15基因水平的表达,运用免疫组化（IHC）方法检测各组膝关节软骨标本中IL-15蛋白水平的表达。最后应用统计学方法分析IL-15的表达与软骨退变程度及K-L分级之间的相关性。结果:1、HE染色结果:（1）轻度组:软骨基质染色较均衡,软骨层稍薄,表面不平坦,偶尔会形成裂缝,细胞大小差异不大,细胞排列不规则,可见软骨细胞簇,偶尔可见空泡细胞,拥有完整潮线;（2）中度组:软骨基质未均匀着色,软骨表面毛糙缺损,仅软骨表层有纤维化,细胞形态不规则,排列杂乱无章,大量软骨细胞集中分布成团,潮线连续性被破坏;（3）重度组:软骨基质着色明显减退,软骨深层可见纤维化,软骨层结构的一部分被完全破坏,软骨细胞的数量显著减少,并且排列混乱。2、Mankin评分结果:轻度组:2.00±1.07,中度组:5.50±0.85,重度组:8.75±1.71;三组软骨标本的平均Mankin评分不同,轻度组、中度组、重度组的Mankin评分呈逐渐上升趋势,差异具有统计学意义（χ2=24.933,P<0.001）。3、qRT-PCR结果显示:轻度组:0.43±0.08,中度组:0.94±0.38,重度组:2.92±0.75;三组标本的IL-15 m RNA表达水平不同,轻度组、中度组、重度组的IL-15 m RNA表达量呈逐渐上升趋势,差异具有统计学意义（χ2=25.554,P<0.001）。4、IHC结果显示:轻度组:2.00±1.07,中度组:5.20±1.03,重度组:10.00±1.48。三组标本的IL-15蛋白表达水平不同,轻度组、中度组、重度组的IL-15蛋白表达呈逐渐上升趋势,差异具有统计学意义（χ2=26.004,P<0.001）。5、Spearman分析结果:IL-15蛋白表达与K-L分级存在显著正相关（rs=0.947,P<0.001）;IL-15 m RNA表达与K-L分级存在显著正相关（rs=0.939,P<0.001）,表明随着K-L分级的增高,IL-15的表达水平逐渐增加。IL-15蛋白表达与Mankin评分呈正相关（rs=0.871,P<0.001）;IL-15m RNA表达与Mankin评分呈正相关（rs=0.882,P<0.001）,这提示患者膝关节软骨的Mankin病理评分越高,关节软骨中IL-15的表达水平也越高。结论:KOA关节软骨中IL-15的表达水平与疾病的严重程度相关:IL-15的表达与关节软骨的退变程度呈正相关。
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