【摘 要】
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目的探讨不同剂量肝素对于脓毒症大鼠肠道损伤的干预效应及对脓毒症大鼠7天生存情况的影响。方法60只成年清洁级雄性SD大鼠,随机分为5组(n=12),假手术组(Sham组)、模型组(CLP组)、给予低剂量肝素组(L组,50IU/kg)、中剂量肝素组(M组,150IU/kg)和高剂量肝素组(H组,250IU/kg)。除Sham组以外四组均采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型,Sham组仅开腹暴露盲
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目的探讨不同剂量肝素对于脓毒症大鼠肠道损伤的干预效应及对脓毒症大鼠7天生存情况的影响。方法60只成年清洁级雄性SD大鼠,随机分为5组(n=12),假手术组(Sham组)、模型组(CLP组)、给予低剂量肝素组(L组,50IU/kg)、中剂量肝素组(M组,150IU/kg)和高剂量肝素组(H组,250IU/kg)。除Sham组以外四组均采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型,Sham组仅开腹暴露盲肠,不结扎,关腹。各肝素组大鼠每4小时给药一次,Sham组及CLP组在相同时间给予等量的生理盐水。术后24h留取静脉血,用酶联免疫吸附实验(ELISA)的方法检测血清白介素1(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及D-乳酸水平;取血后处死全部大鼠留取小肠组织标本做HE染色,光学显微镜下观察小肠组织病理学改变并进行chiu’s评分;采用Western blot法检测小肠组织紧密联接蛋白Occuldin,及炎症通路蛋白NF-κb、TLR-4的表达水平;Tunel法测定小肠细胞凋亡率。另取60只成年清洁级雄性SD大鼠,按上述分组、造模和给药方式后观察5组大鼠7天生存情况。结果与Sham组比较,CLP组、L组、M组及H组在术后4-6小时后均出现竖毛,活动减少,反应迟钝,停止摄食摄水等症状,肠道粘膜病理学损伤严重,肠道上皮细胞凋亡率增加(P<0.05),IL-1、IL-6、TNF-α、TLR-4、NF-κb表达上升(P<0.05),血D-乳酸水平增加(P<0.05),occludin蛋白表达量下降(P<0.05);与CLP组比较,L组、M组H组肠道粘膜病理学损伤减轻,肠道上皮细胞凋亡率降低(P<0.05),IL-1、IL-6、TNF-α、TLR-4、NF-κb表达下降(P<0.05),血D-乳酸水平降低(P<0.05),occludin蛋白表达量上升(P<0.05);L组、M组、H组组间比较,H组上述指标效果最佳(P<0.05)。与Sham比较,CLP组、L组、M组、H组7天生存率下降(P<0.05);与CLP组比较,L组、M组、H组7天生存率上升(P<0.05);而L组、M组、H组组间两两比较生存率无统计学差异(P>0.05)。结论1、肝素干预对于脓毒症大鼠的肠道损伤具有一定保护作用,且与肝素应用的剂量相关。2、肝素干预可能通过增加肠道occludin蛋白的表达,降低TOLL通路TLR4、NF-κb的表达从而减少炎症介质IL-1、IL-6及TNF-α释放及减少肠道上皮细胞凋亡、降低血D-乳酸水平从而对脓毒症大鼠肠道起到保护作用。
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