方法：1根据野生表位肽RAHYNIVTF的结构和初步血浆实验结果，确定改造部位，将得到的模拟表位肽进行分子动力学模拟和结合自由能的计算。2采用标准Fmoc方案固相合成技术对表位模拟肽进行合成、纯化和分子量鉴定。3运用T2细胞对野生型表位肽和表位模拟肽与HLA-A2分子亲和力进行分析。4采用标准的乳酸脱氢酶方法检测人的毒性T淋巴细胞对于T2靶细胞的免疫杀伤效应。结果：1根据表位肽的结构和初步实验结果，分别在将1位和4位点用D型氨基酸单突变和双突变替换，得到①（d）RAHYNIVTF，②RAHY(d)NIVTF,③（d）RAH（d）YNIVTF3条表位模拟肽。2分子动力学结果表明：野生型表位肽和表位模拟肽与MHC-I分子的结合比较稳定，与各个口袋中氨基酸结合也比较合理。3对合成的表位模拟肽纯度和分子量进行分析，证明纯度均已达到95%以上，分子量和目标化合物相吻合，可为后续实验所用。4亲和力实验发现野生型表位肽为中等亲和力，改造后的①（d）RAHYNIVTF FI值最高，与HLA-A2亲和力最强，而另两条D型改造的模拟肽则完全没有亲和力。5运用乳酸脱氢酶方法对野生型表位肽和3条表位模拟肽刺激的CTL进行杀伤效果测试，野生型表位肽为57.87%，①表位模拟肽为33.46%，而其他两条没有明显的杀伤效果。结论1采用血浆中稳定性实验，首次分析了野生型表位肽的体外半衰期。2用D型氨酸替换的模拟表位肽可以有效提高在血浆中酶的耐受性。3体外细胞实验中证明了①（d）RAHYNIVTF可以诱导CTL产生杀伤作用，但没有野生型表位肽效果好。从以上结论得出，虽然改造的①（d）RAHYNIVTF免疫原性降低，但体外半衰期明显延长，且亲和力也增强，如果通过佐剂或者其他辅助的修饰，以提高其免疫原性，将有可能得到稳定，亲和力高，免疫效果强的表位模拟肽，为治疗性CTL疫苗的设计进一步奠定基础。