目的:近年来,过继性细胞免疫疗法得到飞速发展,逐渐成为对抗癌症的强大力量,有望在复发性和难治性肿瘤患者中发挥良好的治疗作用。通过嵌合抗原受体(CAR)重新编辑患者自体T淋巴细胞得到的CAR-T细胞,用来靶向患者恶性肿瘤细胞的方法,已取得显著的成绩。目前,基于T淋巴细胞和NK细胞的CAR细胞疗法已广泛的在血液系统恶性肿瘤中成功进行临床Ⅰ/Ⅱ期试验研究,包括急性淋巴细胞白血病(acute T-lymphoblastic leukemia,T-ALL)、恶性淋巴瘤和慢性淋巴细胞性白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)等。靶向CD19的CAR-T细胞成功诱导了急性B淋巴细胞白血病患者的长期缓解。当前,多项关于CAR-T细胞的临床试验和不同抗原靶标的实验研究正处于临床前研究阶段。与CAR-T细胞的大量临床前和临床试验相反,目前对基于CAR工程改造的NK细胞用于治疗恶性肿瘤的研究和疗效却知之甚少,大多数实验研究还处于临床前阶段。本研究探讨特异性靶向CD7分子的嵌合抗原受体(CD7-CAR)修饰的NK-92MI细胞对CD7~+血液系统恶性肿瘤细胞的杀伤作用。方法:通过临床诊断及实验室流式细胞术的检测结果,分别收集5例CD7~+的T-ALL、10例急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)和6例T细胞淋巴瘤3类血液系统恶性肿瘤细胞,经实验室离心处理、培养后检测肿瘤细胞表面靶标的表达水平;应用流式细胞术检测NK-92MI和CD7-CAR-NK-92MI细胞的转染效率;使用7-AAD和Ig G Fc-PE经流式细胞术检测CD7-CAR-NK-92MI细胞对CD7~+血液肿瘤细胞的体外杀伤效率。用CBA试剂盒检测杀伤后NK-92MI和CD7-CAR-NK-92MI细胞因子白介素(interleukin,IL)-2、干扰素(interferon,IFN)-γ及颗粒酶B的分泌差异。结果:CD7-CAR修饰的NK-92MI细胞对CD7~+的T-ALL、AML、T细胞淋巴瘤肿瘤细胞的杀伤效率明显高于未被基因修饰的阴性对照组NK-92MI细胞,其差异具有统计学意义(P<0.05);与未被基因修饰的NK-92MI细胞相比,经CD7-CAR修饰的NK-92MI细胞分泌的细胞因子中,IFN-γ和颗粒酶B的水平明显升高(P<0.05)。结论:经CD7-CAR修饰的NK-92MI细胞对CD7~+T-ALL、AML和T淋巴瘤细胞的杀伤效率明显提高,且具有特异性靶向作用,这为CD7-CAR-NK-92MI细胞治疗CD7~+的血液系统恶性肿瘤提供了临床依据。