论文部分内容阅读
伤口愈合是一个多阶段组成的复杂过程，主要包括炎症阶段、增殖与迁移阶段和重塑阶段。伤口愈合缓慢是目前临床中一直困扰的问题，炎症阶段的延长或过激，细胞增殖和迁移受到阻碍，都影响伤口愈合的进程，有研究表明，改善伤口的炎症反应，促进成纤维细胞和角质化形成细胞的增殖和迁移，能够加速伤口愈合。而小麦胚芽具有抗炎和促进细胞增殖、迁移的作用，但关于小麦胚芽肽促进伤口愈合的研究未见报道。
本论文在研究小麦胚芽肽(YDWPGGRN，以下简称YDW)对巨噬细胞RAW264.7、成纤维细胞L929和角质形成细胞HaCaT活性影响的基础上，通过构建SD大鼠创伤动物模型研究了其对伤口愈合的促进作用。主要研究结果如下：
1、小麦胚芽肽改善炎症反应，促进成纤维细胞和角质形成细胞的增值和迁移
以LPS诱导巨噬细胞为炎症模型，利用Westernblot等实验探究YDW对炎症反应的影响，结果显示NO的分泌减少(p＜0.01)，iNOS和COX-2的蛋白表达降低(p＜0.05)，促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量降低(p＜0.01)，抗炎因子IL-10含量升高(p＜0.01)，NF-κB的异二聚体p65和p50表达受到抑制(p＜0.01)，证明YDW具有改善炎症的效果。以增值率和迁移率为检测指标探究YDW对成纤维细胞和角质形成细胞的影响，结果表明，YDW显著提高成纤维细胞增殖活力(p＜0.01)，通过促进细胞周期G0/G1向S期转化实现，提高细胞迁移率(p＜0.01)，还能上调COL-Ⅰ的蛋白表达(p＜0.01)，显示出YDW具有促进成纤维细胞增殖和迁移的能力，有利于胶原蛋白的形成；角质形成细胞的增殖活力提高(p＜0.01)，迁移率升高(p＜0.01)，显示出YDW具有促进角质形成细胞增殖和迁移的能力。
2、小麦胚芽肽促进大鼠创伤动物模型的伤口愈合
以大鼠伤口模型为研究对象，通过测量伤口面积，组织学和免疫荧光分析等实验探究YDW对大鼠伤口愈合率及伤口愈合过程的影响，YDW能够加速伤口愈合(p＜0.01)，降低了伤口组织中NO含量(p＜0.05)，减少炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌(p＜0.05)，促进IL-10的分泌(p＜0.05)，抑制巨噬细胞等炎性细胞，促进了肉芽组织的生成和皮肤表面器官成熟，提高体内胶原蛋白含量，促进血管生成，证明YDW具有促进伤口愈合的能力。
3、小麦胚芽肽乳膏具有良好稳定性
通过正交试验得乳膏的最佳配比(单硬脂酸甘油酯12%，硬脂酸8%，白凡士林13%，甘油20%，水)制备小麦胚芽肽乳膏，观察乳膏光泽及颜色，测定小麦胚芽肽乳膏的稳定性、pH和YDW回收率等实验，来探究乳膏的性质及YDW的稳定性。结果显示小麦胚芽肽乳膏呈现乳白色，具有良好的光泽和延展性，在离心、高温处理和低温处理后未出现颗粒析出、分层的现象，符合乳膏pH标准，乳膏中的YDW的回收率均为在90%以上，表明YDW在乳膏产品中稳定存在。
综上所述，本研究证明了一种促进伤口愈合的小麦胚芽肽YDW，通过改善体内炎症作用，促进细胞增殖和胶原分泌，加速肉芽组织和血管的生成达到促进伤口的愈合的目的，YDW在乳膏产品中表现出良好的稳定性，为YDW作为促进伤口愈合的功能活性物质和修复表皮的美容产品提供了理论依据。
本论文在研究小麦胚芽肽(YDWPGGRN，以下简称YDW)对巨噬细胞RAW264.7、成纤维细胞L929和角质形成细胞HaCaT活性影响的基础上，通过构建SD大鼠创伤动物模型研究了其对伤口愈合的促进作用。主要研究结果如下：
1、小麦胚芽肽改善炎症反应，促进成纤维细胞和角质形成细胞的增值和迁移
以LPS诱导巨噬细胞为炎症模型，利用Westernblot等实验探究YDW对炎症反应的影响，结果显示NO的分泌减少(p＜0.01)，iNOS和COX-2的蛋白表达降低(p＜0.05)，促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量降低(p＜0.01)，抗炎因子IL-10含量升高(p＜0.01)，NF-κB的异二聚体p65和p50表达受到抑制(p＜0.01)，证明YDW具有改善炎症的效果。以增值率和迁移率为检测指标探究YDW对成纤维细胞和角质形成细胞的影响，结果表明，YDW显著提高成纤维细胞增殖活力(p＜0.01)，通过促进细胞周期G0/G1向S期转化实现，提高细胞迁移率(p＜0.01)，还能上调COL-Ⅰ的蛋白表达(p＜0.01)，显示出YDW具有促进成纤维细胞增殖和迁移的能力，有利于胶原蛋白的形成；角质形成细胞的增殖活力提高(p＜0.01)，迁移率升高(p＜0.01)，显示出YDW具有促进角质形成细胞增殖和迁移的能力。
2、小麦胚芽肽促进大鼠创伤动物模型的伤口愈合
以大鼠伤口模型为研究对象，通过测量伤口面积，组织学和免疫荧光分析等实验探究YDW对大鼠伤口愈合率及伤口愈合过程的影响，YDW能够加速伤口愈合(p＜0.01)，降低了伤口组织中NO含量(p＜0.05)，减少炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌(p＜0.05)，促进IL-10的分泌(p＜0.05)，抑制巨噬细胞等炎性细胞，促进了肉芽组织的生成和皮肤表面器官成熟，提高体内胶原蛋白含量，促进血管生成，证明YDW具有促进伤口愈合的能力。
3、小麦胚芽肽乳膏具有良好稳定性
通过正交试验得乳膏的最佳配比(单硬脂酸甘油酯12%，硬脂酸8%，白凡士林13%，甘油20%，水)制备小麦胚芽肽乳膏，观察乳膏光泽及颜色，测定小麦胚芽肽乳膏的稳定性、pH和YDW回收率等实验，来探究乳膏的性质及YDW的稳定性。结果显示小麦胚芽肽乳膏呈现乳白色，具有良好的光泽和延展性，在离心、高温处理和低温处理后未出现颗粒析出、分层的现象，符合乳膏pH标准，乳膏中的YDW的回收率均为在90%以上，表明YDW在乳膏产品中稳定存在。
综上所述，本研究证明了一种促进伤口愈合的小麦胚芽肽YDW，通过改善体内炎症作用，促进细胞增殖和胶原分泌，加速肉芽组织和血管的生成达到促进伤口的愈合的目的，YDW在乳膏产品中表现出良好的稳定性，为YDW作为促进伤口愈合的功能活性物质和修复表皮的美容产品提供了理论依据。