本研究以人卵巢癌细胞株SK-OV-3为研究对象，探讨阿司匹林对卵巢癌细胞株SK-OV-3细胞增殖、诱导其凋亡的情况，观察凋亡细胞形态学变化，检测bcl-2、bax基因的表达变化，进一步探讨阿司匹林诱导SK-OV-3细胞凋亡的机制。 研究方法：体外培养人卵巢癌细胞株SK-OV-3，以相同浓度种植于96孔板细胞培养中，在含10％胎牛血清的RPMI-1640培养基中，置37℃、CO2含量5％、湿度99％的孵育箱孵育24小时后，更换含0、0.5、1、2、5、10mmol/L浓度的阿司匹林，分别再孵育24、48、72、96小时后取出，用MTT还原法检测细胞增殖情况；用1、5、10mmol/L浓度的阿司匹林与SK-OV-3细胞孵育48小时，然后用流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测细胞凋亡情况和细胞周期的影响；用同样浓度的阿司匹林与SK-OV-3细胞孵育72小时，用Giemsa染色后在光学显微镜下观察凋亡细胞形态学的变化；用反转录聚合酶链反应(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)的方法，检测用药前后凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。所有数据均用均数(x±s)表示，用SPSS统计分析软件进行统计学分析，各组均数的比较行单因素方差分析(ANOVA)，用最小显著差法(1eastsignificantdifference，LSD)作两两比较，p＜0.05为有显著性。 研究结果： 1.阿斯匹林对卵巢癌细胞株增殖的抑制作用：与对照组比较，阿司匹林作用SK-OV-3细胞24、48、72、96小时后，对SK-OV-3细胞的生长有明显的抑制作用，并存在着浓度和时间的依赖性。0.5、1、2、5、10mmol/L阿司匹林作用SK-OV-3细胞72小时细胞的生存率分别为95.60±6.85％、91.23±14.26％、86.07±8.78％、47.96±4.31％、9.39±2.22％，随着浓度提高，卵巢癌细胞的生存率出现明显的降低趋势(P＜0.001)，说明阿斯匹林对SK-OV-3细胞的增殖的抑制有明显的量校关系。终浓度为5mmol/L的阿斯匹林作用细胞24、48、72、96小时，细胞生存率分别为92.19±5.88％、71.72±2.85％、47.96±4.31％及41.24±8.19％，表明随着时间的推移阿斯匹林对SK-OV-3细胞增殖的抑制明显的增加(P＜0.001)，具有明显的时效关系。 2.流式细胞仪检测结果：对照组和1、5、10mmol/L浓度的阿斯匹林作用SK-OV-3细胞48小时，流式细胞仪检测结果显示，SK-OV-3细胞凋亡率分别为4.15±0.74％、11.76±0.81％、18.18±0.43％、30.83±0.44％。实验组与对照组的凋亡百分比比较，实验组SK-OV-3细胞的凋亡率明显增高(p＜0.001)。且随着浓度增加，细胞凋亡的百分比随之增加，各剂量的阿司匹林作用卵巢癌SK-OV-3细胞48小时，在DNA直方图上G1期峰前呈现明显的细胞凋亡峰即亚G1期峰，说明阿斯匹林可诱导卵巢癌SK-OV-3细胞的凋亡。 3.流式细胞仪检测细胞周期的变化：对照组SK-OV-3细胞的G0/G1期和G2/M期细胞数分别为58.93±7.78％和18.04±0.99％；10mmol/L阿司匹林作用48小时后SK-OV-3细胞的G0/G1期和G2/M期的细胞数分别为11.03±1.23％和67.47±9.20％。SK-OV-3细胞经不同浓度阿斯匹林作用48小时后，细胞周期发生明显改变，即随着阿斯匹林浓度的增加，G0/G1期细胞比例下降，G2/M期细胞比例升高(p＜0.001)。分析以上结果可知，阿司匹林在G2/M期阻断SK-OV-3细胞增殖。 4.阿司匹林作用后SK-OV-3细胞形态学变化：对照组SK-OV-3细胞孵育时贴壁生长，呈梭形或多角形，易融合形成集落。终浓度分别为1、5、10mmol/L的阿斯匹林作用卵巢癌SK-OV-3细胞72小时，Giemsa染色后，观察可见细胞的伪足回缩，细胞形态变小，细胞间隙变宽，细胞核浓缩，部分细胞脱落漂浮于培养液中；高倍镜下，可见凋亡细胞体积缩小，细胞膜皱缩，染色体浓缩，细胞核固缩与断裂，核仁消失，形成大小不等的胞内核小体即凋亡小体。与对照组比较，凋亡细胞染色加深，尤其细胞膜染色更明显。0、1、5、10mmol/L阿司匹林作用SK-OV-3细胞72小时，在光学显微镜下计数凋亡细胞的百分数，结果分别为1.1±0.8％,7.67±1.2％，14.92±4.3％，30.67±4.9％，随着浓度增加，细胞凋亡率增加，统计学分析差异有显著性(p＜0.001)。 5.阿司匹林作用SK-OV-3细胞后细胞基因组DNA的变化：阿斯匹林作用SK-OV-3细胞48小时，细胞DNA在琼脂糖凝胶电泳图谱上呈现出明显的梯状条带(DNAladder)，表明阿斯匹林可以诱导SK-OV-3细胞凋亡。 6.阿司匹林对SK-OV-3细胞bcl-2和bax基因mRNA表达水平的影响：阿司匹林作用SK-OV-3细胞前、后，SK-OV-3细胞中bcl-2和bax条带的积分光密度(bcl-2/β-actin和bax/β-actin)标化后分别为0.722±0.335、0.127±0.219和0.224±0.12、0.645±0.24。阿司匹林作用后细胞中的bcl-2基因mRNA表达明显降低，而bax基因mRNA表达明显增高，两种基因表达的差异有统计学意义(p＜0.01)。 研究结论：本研究显示阿司匹林可抑制卵巢癌SK-OV-3细胞增殖并诱导其凋亡，可将在G2/M期阻止SK-OV-3细胞，光学显微镜下可观察到典型的凋亡形态学变化。本研究还首次发现阿司匹林诱导卵巢癌SK-OV-3凋亡的机制可能与下调bcl-2及上调bax基因表达有关。阿司匹林作为卵巢癌化疗的辅助用药可能会增加化疗药的作用，减少肿瘤对化疗药的耐药性。