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研究背景:经典型霍奇金淋巴瘤(classical Hodgkin’s lymphoma,cHL)是霍奇金淋巴瘤的病理类型之一,是起源于淋巴造血系统的恶性肿瘤,主要发生于年轻及老年患者。目前常规化疗疗效较好,但难治/复发型cHL仍缺少有效的治疗方法,因此如何减少并发症、优化、个体化治疗成为目前研究重点。嵌合抗原受体修饰的T细胞(chimeric antigen receptor-modified T cell,CART )是近年来迅速发展的免疫治疗领域的研究热点。目前靶向性针对CD30-CART细胞免疫治疗在我院临床治疗工作中已收获一定成就,但疗效仍待进一步优化。目的:本研究选择不同抗原表位的两种单克隆抗体Ki-4及Ber-H2,优化性构建不同的CAR基因片段的载体,比较两种CART细胞对CD30阳性的cHL细胞系L428的杀伤作用,以及其机制与NF-κB信号通路相关性进行研究。方法:①构建携带不同抗原表位的CD30-CAR基因片段的慢病毒载体;②两种不同抗原表位的CART-30细胞的培养;③两种不同抗原表位CART-30细胞对cHL细胞株的杀伤效率的比较;④CD30-CARs对cHL细胞株NF-κB机制的影响。结果:①成功构建出不同抗原表位的CD30-CART细胞,阳性率平均值约为65.7%左右;②Ki-4组效靶比为1:1时杀伤效率的平均值为35.15%,效靶比为10:1时杀伤效率的平均值为66.99%; Ber-H2组效靶比为1:1时杀伤效率的平均值为31.95%,效靶比为10:1时杀伤效率的平均值为56.11%; CD19组效靶比为1:1时杀伤效率的平均值为21.92%,效靶比为10:1时杀伤效率的平均值为45.49%; CIK组效靶比为1:1时杀伤效率的平均值为16.99%,效靶比为10:1时杀伤效率的平均值为32.22%。P<0.05,不同效应细胞间及不同效靶比间的杀伤效应均有差异,且此差异具有统计学意义。③Western蛋白印迹法结果示:TNF-α组及Ki-42h及3h组P-P65呈强阳性,IκBα蛋白呈弱阳性;而空白对照组、Ki-4的Oh组及Ber-H2各组P-P65及IκBα蛋白均呈现弱阳性。结论:①不同抗原表位的CD30-CART细胞对经典型霍奇金淋巴瘤细胞杀伤作用不同;②Ki-4的scFv能有效激活NF-κB信号通路,但Ber-H2-CARs不能激活NF-κB信号通路。