七氟醚预处理对老龄大鼠术后认知功能障碍的影响

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目的:本研究拟通过探讨卤族类挥发性麻醉剂七氟醚预处理对老龄大鼠术后认知功能障碍的影响情况,为临床相关试验研究及麻醉管理提供参考。方法:健康成年雄性SD大鼠138只,18月龄,体重为400~450g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=46):对照组(C组)、手术组(O组)及七氟醚预处理组(Sev组)。C组:仅对大鼠腹腔注射戊巴比妥钠进行麻醉处理,而不对其进行任何的手术操作。O组:腹腔注射戊巴比妥钠麻醉大鼠后,对其行剖腹探查手术,即对大鼠进行备皮、消毒,然后经腹部正中切口、用镊子钝性分离腹部肌肉并显露腹膜、解剖剪剪开腹膜并暴露腹腔,应用探查针依次探查大鼠的肝脏、脾脏、胃、小肠及大肠,手术时间共为30min,手术结束后缝合伤口,并于伤口处粘贴透气防水伤口贴膜,最后腹腔注射青霉素,以防止术后伤口发生感染。Sev组:将大鼠置于有机玻璃麻醉箱内,进气端连接七氟醚挥发罐,以纯氧作为载体气体,出气端连接麻醉气体监测仪,维持麻醉箱内七氟醚的浓度为2.4%,麻醉箱底部铺设少量的钠石灰以用来吸收二氧化碳,持续30min后吸入空气,吸入空气30min后,处理同O组。每组随机选取10只大鼠,分别于术前30min及术后第1、3、5、7天时,行Morris水迷宫实验,并记录大鼠在原平台象限停留的时间、逃避潜伏期和穿越原平台的次数。分别于术前30min及术后第1、7天时,每组随机选取10只大鼠,麻醉后取海马组织,采用TUNEL细胞凋亡检测技术测定海马神经元的凋亡指数;流式细胞技术测定海马神经元胞浆Ca2+离子浓度([Ca2+]i)、凋亡率;透射电镜下观察大鼠海马神经元超微结构的病理学改变(线粒体、内质网、高尔基体、胞浆及胞核)。每组随机选取6只大鼠,分别于术前即刻(T0)、术中10min(T1)、20min (T2)、30min(T3)时,记录体温并采集动脉血样行血气分析。结果:3组不同时间点的体温及血气分析各指标均在正常范围内,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与术前30min时比较,O组术后各时点大鼠原平台象限停留时间缩短、逃避潜伏期延长和穿越原平台次数减少,大鼠海马神经元胞浆[Ca2+]i、凋亡指数/凋亡率升高(P<0.05);Sev组术后第1、3、5天时原平台象限停留时间缩短、逃避潜伏期延长和穿越原平台次数减少,术后第1天时大鼠海马神经元胞浆[Ca2+]i、凋亡指数/凋亡率升高(P<0.05),Sev组术后第7天时上述各指标差异无统计学意义(P>0.05);C组术后各时点上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。与C组比较,O组术后各时点大鼠原平台象限停留时间缩短、逃避潜伏期延长和穿越原平台次数减少,大鼠海马神经元的胞浆的[Ca2+]i、凋亡指数/凋亡率升高(P<0.05);Sev组术后第1、3、5天时原平台象限停留时间缩短、逃避潜伏期延长和穿越原平台次数减少,Sev组术后第1天时大鼠海马神经元胞浆[Ca2+]i、凋亡指数/凋亡率升高(P<0.05),Sev组术后第7天时上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。与O组比较,Sev组术后各时点大鼠原平台象限停留的时间延长、逃避潜伏期缩短和穿越原平台的次数增加,大鼠海马神经元胞浆[Ca2+]i、凋亡指数/凋亡率降低(P<0.05)。电镜下可见C组海马神经元胞浆内各细胞器结构未见明显异常;O组术后第1天时,海马神经元胞质高度水肿,线粒体嵴内外膜融合消失及空泡化,粗面内质网脱颗粒,术后第7天时,胞质水肿减轻,多数线粒体仍表现为空泡化,高尔基体及粗面内质网结构异常;Sev组术后第1天时,电镜下可见海马神经元胞质轻度水肿,线粒体空泡化,粗面内质网结构异常,但并没有扩张及脱颗粒现象,术后第7天时,电子显微镜下可见神经元线粒体空泡化明显减少,粗面内质网结构接近正常。结论:12.4%七氟醚预处理可减轻老龄大鼠术后认知功能障碍。2其机制与调节钙稳态失衡,降低海马神经元胞浆钙离子浓度,抑制海马神经元的凋亡有关。
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