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目的:1.研究动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)时血管平滑肌细胞(VSMC)大电导钙激活钾通道(BKca)活性是否发生变化,进一步探讨其在AS时有无作用及意义。2.研究硝酸甘油(NTG)是否可以令VSMC的BKca开放以及与正常组织相比AS时VSMC的BKca对NTG的反应有无改变,从而在离子通道水平探讨NTG的扩血管机制,为AS的治疗和药品研发提供理论依据及新的思路。
方法:1.本实验采用纯系新西兰兔20只,3月龄,雌雄各半,体重1.75±0.25kg,随机分为两组:实验组(动脉粥样硬化组,AS组)和对照组(正常组,N组),每组各10只。AS组喂高脂饲料(组成:0.5%胆固醇+5%猪油+15%蛋黄粉+79.5%普通饲料)以建立AS模型,对照组仅喂普通饲料,两组均喂8周。然后通过肉眼观察,光镜检查和电镜检查三者结合,辅以半定量评分法鉴定AS模型兔的胸主动脉的AS病理变化是否达到要求。2.选用单通道膜片钳技术,观察并记录两组兔胸主动脉平滑肌细胞BKca在cell-attachedpatches(细胞吸附式膜片)及inside-outpatches(内面向外式膜片)下的通道电流;再在inside-outpatches下加入不同浓度的Ca2+液,观察并记录通道电流;彻底灌洗浴槽后在inside-outpatches下加入不同浓度的NTG溶液观察并记录通道电流。3.利用P-Clamp9.0软件分析处理所记录结果;4.采用比较均数法的成对样本t检验进行两组间差异性比较,用药前和用药后采用自身配对t检验。
结论:1.AS组VSMC的BKca活性较对照组明显增强。2.AS组VSMC的BKca的Ca2+敏感性较对照组明显降低。3.NTG可激活VSMC的BKca。4.NTG对AS组VSMC的BKca的作用较对照组明显下降。