研究背景DAB2IP(DOC-2/DAB2 interactive protein)基因是一个新发现的抑癌基因,与许多肿瘤都息息相关。近来许多研究人员发现,DAB2IP在多种肿瘤的发生发展的过程中出现表达下调或缺失,例如在前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌、肺癌等。DAB2IP在这些肿瘤中研究的不断深入,但在食管癌中的表达和作用尚不清楚。研究目的探讨DAB2IP在食管癌中的表达水平和是否对食管癌的放疗敏感性发挥作用。研究方法通过Western Blot检测正常食管和食管癌中的DAB2IP表达情况。构建Kyse150稳转过表达细胞株Kyse150-DAB2IP和对照组Kyse150-vector,和EC109稳定敲除细胞株对照组EC109-shluc和敲除组EC109-sh DAB2IP。通过流式细胞术测凋亡检测EC109-shluc和EC109-sh DAB2IP对辐射后凋亡的影响。对EC109-shluc和EC109-sh DAB2IP的细胞进行辐射处理,再进行免疫荧光共聚焦实验检测53BP1和γ-H2AX的表达,对比DAB2IP是否对放疗引起的损伤有影响。建立Kyse150裸鼠移植瘤模型,裸鼠成瘤后分别做辐射和不辐射处理,量取肿瘤大小并做统计分析。将切下来的肿瘤做免疫组化和免疫荧光共聚焦实验。最后用Western Blot探索DAB2IP增加放疗敏感性可能的机制。研究结果WB检测发现正常细胞中DAB2IP蛋白表达水平较高,而ESCC细胞系均表达相对较低的DAB2IP。Annexin-V/PI双染法显示DAB2IP的敲除会导致细胞凋亡减少。细胞免疫荧光共聚焦显示EC109-sh DAB2IP的DNA损伤修复多于EC109-shluc。裸鼠成瘤实验中相比Kyse150-vector收到6Gy的辐射处理,Kyse150-DAB2IP的肿瘤在受到6Gy的IR辐射处理后,生长受到明显抑制。通过免疫组化检测移植瘤中的DAB2IP表达情况。通过免疫荧光染色测定移植瘤中53BP1和γ-H2AX的表达,对比两组的DNA损伤情况发现Kyse150-DAB2IP的肿瘤DNA修复的更少。最后WB的结果显示,DAB2IP增强放疗敏感性的机制可能是通过ASK1-JNK通路。研究结论DAB2IP在食管癌中蛋白表达水平较低。DAB2IP影响辐射后细胞凋亡和DNA损伤相关,其低表达可引起食管癌的放疗抵抗,因此DAB2IP有可能成为食管癌疗效的一个重要参考,并成为放射治疗的一个有效的突破口。