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无核葡萄因其无核特性,食用方便,在葡萄鲜食和制干方面占有重要位置。培育优良的无核葡萄是众多葡萄育种学家的目标。目前生产上栽培的无核品种多数属于欧亚种葡萄(Vitis vinifera),品质优良,但是抗病抗逆性性差,尤其是抗寒性差,寒害是我国北方地区葡萄生产的突出问题。我国拥有丰富的抗寒山葡萄种质资源,通过杂交的方式将其抗寒性特性与无核葡萄无核特性相结合,培育抗寒无核葡萄新品种是一条重要的育种途径。传统的无核葡萄育种采用有核葡萄作母本,无核葡萄作父本杂交,后代出现无核植株的概率较低,而利用胚挽救技术可以实现以无核葡萄作母本杂交,且提高后代植株的无核比例。本研究以种子败育型无核葡萄作母本,中国野生山葡萄或者其杂种F1优株作父本杂交,通过胚挽救技术进行杂交胚培养,创制抗寒无核葡萄新种质,并对影响胚挽救效率的重要因素进行了研究,以期提高育种效率。取得的主要结果为:1.基本培养基对胚挽救效果有影响。通过研究ER培养基和MM3+500 mg/L CH培养基对胚发育的影响,发现MM3+500 mg/L CH培养基更适合作为种子败育型无核葡萄与中国野生山葡萄及其F1优株杂交胚的发育培养基。2.前期试验证实1mmol/L丝氨酸能够促进胚的进一步发育,因此在MM3+500 mg/L CH+1mmol/L丝氨酸培养基中添加外源激素IAA,研究IAA对胚挽救的影响。结果表明,添加IAA的影响依不同母本类型而定,其中外源IAA能使‘红宝石无核’ב00-1-5’胚的发育率高达57.7%,但却抑制了‘海王星’ב00-1-5’和‘波尔莱特’ב00-1-5’的杂交胚的发育。3.在胚发育培养MM3+500 mg/L CH+1mmol/L丝氨酸中添加不同浓度的6-BA,对不同组合胚发育率、成苗率影响较显著。0.5mg/L6-BA能够促进胚的发育,当6-BA浓度为1.0 mg/L时,对胚挽救效率具一定程度的促进作用或作用不显著;当6-BA浓度为1.5 mg/L时,对胚的发育具抑制作用,且对‘火焰无核’ב北醇’、‘木星’ב北醇’、‘海王星’ב北醇’杂交胚的成苗具有一定的抑制作用。4.杂交亲本对胚挽救效率影响较大,‘克瑞森无核’、‘红宝石无核’、‘火焰无核’作母本杂交时,胚的发育率和成苗率较高,是比较适宜于胚挽救的母本类型;其次是‘木星’;而‘海王星’、‘波尔莱特’、‘美丽无核’、‘苏-67’作母本时,胚挽救效果不佳,不宜选作母本。欧山杂种‘00-1-5’比‘北醇’更适于作胚挽救育种的杂交父本。5.通过石蜡切片技术,对‘木星’和‘海王星’的胚、胚乳进行了细胞学观察,确定其胚发生败育时期,推测出其作为无核葡萄胚挽救杂交母本的最佳取样时期,‘木星’为花后38d,‘海王星’花后36d。6.通过分子标记对获得的胚挽救杂种苗进行了早期辅助选择。用无核标记GLSP1-569对‘美丽无核’ב00-1-5’、‘火焰无核’ב00-1-5’共22个株系进行鉴定,初步鉴定出5个无核株系;用无核标记SCF27-2000对‘苏-67’ב00-1-5’、‘海王星’ב00-1-5’、‘红宝石无核’ב00-1-5’共87个株系进行检测,初步筛选出无核株系48个。用抗寒标记S241-670对‘美丽无核’ב北醇’、‘赫什无核’ב黑龙江实生’、‘木星’ב黑龙江实生’、‘木星’ב双优’共36个株系进行鉴定,初步筛选出抗寒株系15个。