5-氟尿嘧啶关节腔内注射对实验性大兔骨关节炎后白介素-1及超氧化物歧化酶(SOD)的影响

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目的:骨性关节炎是常见的慢性关节疾患,治疗方法繁多,以保守治疗为主。但是其治疗长期以来都是临床上一个棘手的难题,目前尚不能从根本上阻止骨性关节炎的病理进程。近年来医学界都在积极探索治疗骨性关节炎的新疗法,新技术。关节腔内注射药物疗法的作用早已被多年的临床实践所证实,大量患者也因此受益。本课题以新西兰大白兔为实验对象,造成骨关节炎动物模型,应用5-氟尿嘧啶关节腔内注射治疗兔骨性关节炎,通过大体观察,电镜观察以及血清关节液白介素-1β(IL-1β)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量测定,探讨5-氟尿嘧啶关节腔内注射治疗骨性关节炎的作用及作用机制,为临床治疗提供实验依据。方法:符合实验标准健康清洁新西兰大白兔24只,体重2.0kg-2.5kg,兔龄六个月,均为成年雄性。应用随机数字表将实验动物均分为5-氟尿嘧啶组(5Fu组)、玻璃酸钠组(SH组)、生理盐水组(对照组),每组8只。于实验第1,4,7天将实验动物四肢固定后,用5ml注射器在右膝髌骨内缘中点进针穿刺进入膝关节腔,回抽无血,将4%木瓜蛋白酶0.3ml注入兔膝关节腔内,注射1周后得到兔骨性关节炎模型。按照组别采用5-氟尿嘧啶、玻璃酸钠注射液及生理盐水关节腔内注射治疗。每周一次,连续四次,最后一次注射后一周处死动物。进行关节滑膜、软骨大体观察,利用透射电镜观察关节滑膜细胞形态变化,采用ELISA双抗夹心法标记所收集血清、关节液中的IL-1β,使呈有色反应,酶标仪450nm处读取OD值,通过绘制标准曲线,计算出其中IL-lβ浓度。运用黄嘌呤氧化酶法测定血清及关节液SOD浓度。结果:(1)大体观察:5Fu组滑膜略见增厚,软骨组织无明显缺损,关节软骨表面粗糙,颜色灰暗。SH组和对照组与5Fu组比较,滑膜增生明显,关节软骨表面颜色灰暗,可见溃疡形成。对照组滑膜增厚最明显,有部分软骨缺损、脱落,可见软骨下骨。(2)电镜结果:正常组可见正常滑膜细胞,细胞膜完整。5FU组可见细胞固缩,细胞核电子密度增高,见许多棘状突起,处于凋亡状态。玻璃酸钠组可见部分线粒体成空泡样变性,细胞质内见许多溶酶体,可见粗面内质网。对照组图片呈现大量线粒体空泡样变性,无正常细胞结构。(3)5-氟尿嘧啶治疗组IL-1β含量低于同期玻璃酸钠组及对照组,有显著性差异(P<0.01)。(4)5-氟尿嘧啶治疗组SOD含量高于同期玻璃酸钠组及对照组,差异性显著(P<0.01)。结论:5-氟尿嘧啶关节腔内注射能够降低大兔骨性关节炎损伤后IL-1β蛋白的表达,并可促进超氧化物歧化酶(SOD)的分泌,从而减轻关节内软组织损伤,加速关节修复。实验说明了5-氟尿嘧啶关节腔内注射具有减轻炎性反应、促进关节软组织修复的作用。为5-氟尿嘧啶在临床治疗中的推广和使用提供实验依据。
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