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目的:溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis，UC)是累及结肠和直肠黏膜的慢性非特异性炎症性疾病，近年来，中国人群发病率呈现出明显的增长。但UC的病因与发病机制至今仍不明确。本研究拟通过相关实验方法，来探索DJ1在UC发生发展中的作用以及DJ1是否通过P53实现相关调控。
方法:体外采用不同细胞系构建UC炎症模型、凋亡模型及共培养屏障模型;体内选取DJ1基因敲除小鼠及野生型小鼠，分别采用正常饮食、DSS处理构建急性肠炎模型。通过小干扰RNA、重组腺病毒技术并结合DJ1基因敲除(DJ1KO)小鼠，利用qRT-PCR、WB、免疫组化、流式细胞仪等分子生物学手段观察DJ1对结肠炎症、凋亡、细胞损伤及肠道粘膜屏障功能的影响。进一步分析DJ1对P53的调控作用及对结肠上皮细胞炎症及凋亡的影响。
结果:DJ1在Caco2构建的细胞炎症模型和DSS构建的急性肠炎模型中表达显著下降(mRNA:1.015VS0.840,p＜0.05;mRNA:NC=1.062VS3.5％DSS=0.540VS4％DSS=0.303，P＜0.05)，同时在人体UC结肠粘膜中的表达也明显减少(IOD:NC0.317±0.023VS CD0.234±0.007VS UC0.211±0.004，P＜0.05)。体外抑制DJ1的表达促进炎症因子TNF-α，iNOS和IL-6的表达(3.549±0.333VS7.376±0.425，P＜0.05;7.877±0.366VS11.300±0.565,P＜0.001;1.596±0.371VS2.807±0.215,P＜0.05)，高表达DJ1则相反，检测到TNF-α，iNOS，IL-8炎症因子的表达较前下降(20.840±0.055VS11.280±0.969,P＜0.001;29.780±1.571VS19.250±1.548,P＜0.01;8.116±0.471VS5.489±0.323，P＜0.01);体外抑制DJ1还能加重细胞损伤和凋亡(LDH:0.752±0.003VS0.974±0.022,P＜0.001;caspase3/7activity:1.784±0.082VS3.918±0.046，P＜0.001)。体内研究发现DJ1基因敲除进一步降低DSS诱导急性肠炎的小鼠体重(0.944±0.027VS0.731±0.010，P＜0.001)及结肠长度(6.200±0.260VS5.100±0.055，P＜0.05)，促进中性粒细胞及巨噬细胞的聚集，上调结肠粘膜及血清中炎症因子表达（结肠黏膜IL-6:2.281±0.421VS23.400±5.744，P＜0.001;IL-1β:4.232±1.083VS12.660±1.545,P＜0.0001;MCP-1:2.261±0.346VS14.900±3.673，P＜0.001;血清TNF-α:4.490±0.892VS25.070±9.140，P＜0.001），破坏肠道屏障功能及紧密连接。进一步在UC细胞模型DJ1低表达的基础上，抑制P53的表达，发现细胞损伤有所缓解(LDH:0.814±0.005VS0.626±0.003，P＜0.001)。
结论:DJ1在体内外UC模型及人体中表达显著下降，抑制DJ1能加重结肠细胞炎症、凋亡、细胞损伤及肠道粘膜屏障功能破坏，提示DJ1在UC发生发展过程中可能起到保护作用，且其作用极有可能是通过调控下游P53实现的。药物激活DJ1可能成为UC的潜在分子治疗靶点。
方法:体外采用不同细胞系构建UC炎症模型、凋亡模型及共培养屏障模型;体内选取DJ1基因敲除小鼠及野生型小鼠，分别采用正常饮食、DSS处理构建急性肠炎模型。通过小干扰RNA、重组腺病毒技术并结合DJ1基因敲除(DJ1KO)小鼠，利用qRT-PCR、WB、免疫组化、流式细胞仪等分子生物学手段观察DJ1对结肠炎症、凋亡、细胞损伤及肠道粘膜屏障功能的影响。进一步分析DJ1对P53的调控作用及对结肠上皮细胞炎症及凋亡的影响。
结果:DJ1在Caco2构建的细胞炎症模型和DSS构建的急性肠炎模型中表达显著下降(mRNA:1.015VS0.840,p＜0.05;mRNA:NC=1.062VS3.5％DSS=0.540VS4％DSS=0.303，P＜0.05)，同时在人体UC结肠粘膜中的表达也明显减少(IOD:NC0.317±0.023VS CD0.234±0.007VS UC0.211±0.004，P＜0.05)。体外抑制DJ1的表达促进炎症因子TNF-α，iNOS和IL-6的表达(3.549±0.333VS7.376±0.425，P＜0.05;7.877±0.366VS11.300±0.565,P＜0.001;1.596±0.371VS2.807±0.215,P＜0.05)，高表达DJ1则相反，检测到TNF-α，iNOS，IL-8炎症因子的表达较前下降(20.840±0.055VS11.280±0.969,P＜0.001;29.780±1.571VS19.250±1.548,P＜0.01;8.116±0.471VS5.489±0.323，P＜0.01);体外抑制DJ1还能加重细胞损伤和凋亡(LDH:0.752±0.003VS0.974±0.022,P＜0.001;caspase3/7activity:1.784±0.082VS3.918±0.046，P＜0.001)。体内研究发现DJ1基因敲除进一步降低DSS诱导急性肠炎的小鼠体重(0.944±0.027VS0.731±0.010，P＜0.001)及结肠长度(6.200±0.260VS5.100±0.055，P＜0.05)，促进中性粒细胞及巨噬细胞的聚集，上调结肠粘膜及血清中炎症因子表达（结肠黏膜IL-6:2.281±0.421VS23.400±5.744，P＜0.001;IL-1β:4.232±1.083VS12.660±1.545,P＜0.0001;MCP-1:2.261±0.346VS14.900±3.673，P＜0.001;血清TNF-α:4.490±0.892VS25.070±9.140，P＜0.001），破坏肠道屏障功能及紧密连接。进一步在UC细胞模型DJ1低表达的基础上，抑制P53的表达，发现细胞损伤有所缓解(LDH:0.814±0.005VS0.626±0.003，P＜0.001)。
结论:DJ1在体内外UC模型及人体中表达显著下降，抑制DJ1能加重结肠细胞炎症、凋亡、细胞损伤及肠道粘膜屏障功能破坏，提示DJ1在UC发生发展过程中可能起到保护作用，且其作用极有可能是通过调控下游P53实现的。药物激活DJ1可能成为UC的潜在分子治疗靶点。