【摘 要】
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目 的:构建不同程度小鼠急性结肠炎、重度结肠炎早中晚期以及MP干预2%DSS诱导的肠炎模型,研究结肠粘膜中心粒旁物质1（Pericentriolar Material 1,PCM1）与炎症因子的变化情况。方法:运用不同浓度 2%、3%、4%葡聚糖硫酸钠（Dextran Sulfate Sodium salt,DSS）诱导不同程度小鼠结肠炎、高浓度4%DSS诱导小鼠重度结肠炎早中晚期以及甲泼尼龙（m
【基金项目】
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国家自然科学基金（81960108）； 云南省科技厅科技计划项目（2019FE001（-036））；
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目 的:构建不同程度小鼠急性结肠炎、重度结肠炎早中晚期以及MP干预2%DSS诱导的肠炎模型,研究结肠粘膜中心粒旁物质1（Pericentriolar Material 1,PCM1）与炎症因子的变化情况。方法:运用不同浓度 2%、3%、4%葡聚糖硫酸钠（Dextran Sulfate Sodium salt,DSS）诱导不同程度小鼠结肠炎、高浓度4%DSS诱导小鼠重度结肠炎早中晚期以及甲泼尼龙（methylprednisolone,MP）干预2%DSS诱导的结肠炎小鼠模型,采用（Disease Activity Index,DAI）及结肠组织病理学评分评估结肠炎症程度,实时定量聚合酶链式反应（Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR）,免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）及蛋白印迹技术检测结肠组织中PCM1,白介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）,肿瘤坏死因子α（Tumor Necrosis Factor Alpha,TNF-α）,白介素-6（Interleukin-6,IL-6）的转录及表达。结 果:1.不同浓度DSS诱导的不同程度结肠炎实验DSS浓度越高,诱导的小鼠结肠炎越严重。免疫组化中饮用DSS组小鼠PCM1阳性表达集中在结肠淋巴滤泡处,正常组未见明显表达;肠炎越重,IL-1β表达越多。qRT-PCR结果表明:PCM1 mRNA随结肠炎加重而增加,但结肠炎严重到一定水平,逐步回落,2%DSS组与正常组、2%DSS组与4%DSS组差异具有统计学（P<0.01）,3%DSS组较正常组明显增加（P<0.05）;IL-1β,IL-6,TNF-α结肠炎越重,表达越多。Western Blotting显示:PCM1表达趋势与转录一致,除正常组与4%DSS组不具有统计学意义,其余各组之间两两比较差异均具有统计学意义（P<0.01）。2.高浓度4%DSS诱导的重度结肠炎不同时期实验随着时间疾病进展,小鼠结肠炎越重;免疫组化中饮用DSS组小鼠PCM1蛋白在结肠淋巴滤泡处存在阳性表达;随着疾病进展,IL-1β蛋白表达增多。qRT-PCR显示:不同时期的结肠组织PCM1 mRNA随着结肠炎的发展先增加后回落,4%DSS五天组相较正常组及4%DSS七天组明显增加（P<0.01）,4%DSS三天组与正常组比较差异具有统计学意义（P<0.05）;IL-6,TNF-α,IL-1β均随着时间疾病进展,表达越多。在Western Blotting中PCM1表达趋势与qRT-PCR结果一致,4%DSS五天组与其余三组具有差异统计学（P<0.01）;4%DSS三天组与正常组、4%DSS七天组差异具有统计学意义（P<0.05）。3.MP干预实验2%DSS+MP组结肠炎较2%DSS组轻,在免疫组化中PCM1蛋白的表达同之前的实验一致,饮用DSS组结肠淋巴滤泡处有阳性表达;IL-1β在2%DSS+MP组较 2%DSS 组减少。qRT-PCR 显示:PCM1,IL-6,TNF-α,IL-1β mRNA 在MP+2%DSS组较2%DSS组表达减少,PCM1在二者之间差异具有统计学意义（P<0.05）。在 Western Blotting 实验中,PCM1 在 2%DSS+MP 组相较 2%DSS 组表达下降,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.PCM1在急性轻度结肠炎及急性重度结肠炎早中期转录及表达升高,在急性重度结肠炎后期呈回落表现,提示PCM1可能是急性期炎症反应蛋白。2.PCM1阳性表达的部位主要集中在结肠淋巴滤泡处,与炎症因子变化相关,提示PCM1可能与免疫细胞相关联,参与溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis,UC）发生的发生、发展。
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