【摘 要】
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目的:探讨NF-κB在小鼠哮喘气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)表型转化的作用。方法:建立小鼠慢性哮喘模型,采用贴块法培养正常、哮喘模型小鼠ASMCs,取各自
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目的:探讨NF-κB在小鼠哮喘气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)表型转化的作用。方法:建立小鼠慢性哮喘模型,采用贴块法培养正常、哮喘模型小鼠ASMCs,取各自第5-8代ASMCs进行实验。Real-time PCR检测ASMCs收缩标记物m RNA差异;Western blot检测α-SMA蛋白及NF-κB活化差异;构建ASMCs表型转化过程,Western blot检测α-SMA蛋白及NF-κB活化差异;NF-κB抑制剂处理哮喘ASMCs,Western blot检测处理前后α-SMA蛋白及NF-κB活化差异;MTT检测不同组ASMCs增殖变化;流式细胞仪检测不同组ASMCs细胞凋亡变化。结果:(1)与正常ASMCs组比较,哮喘ASMCs组sm MHC、calmodulin的m RNA降低(P<0.05),但α-SMA无显著差异(P>0.05);蛋白水平,哮喘ASMCs组α-SMA表达显著降低(P<0.01)、NF-κB明显活化(P<0.01)。(2)正常ASMCs组血清饥饿、血小板衍生生长因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)干预后,饥饿时间延长α-SMA表达增多(P<0.05)、NF-κB活化减弱(P<0.01),而PDGF处理后逆转该作用。(3)NF-κB抑制剂处理哮喘ASMCs组后,NF-κB活化减弱(P<0.01)而α-SMA表达增多(P<0.05)。(4)与正常ASMCs组相比,哮喘ASMCs组增殖较快、凋亡减慢(P<0.05),而NF-κB抑制剂干预哮喘ASMCs后减缓增殖、加快凋亡(P<0.05)。结论:(1)哮喘组ASMCs的细胞表型以合成型为主,可能与NF-κB活化有关。(2)抑制NF-κB活化后诱导哮喘合成型ASMCs向收缩型转化增加。(3)NF-κB参与哮喘ASMCs表型转化、增殖及凋亡过程,可望为哮喘治疗新的靶点。
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