烤烟作为春季移栽的作物之一,其面临“倒春寒”的可能性更大。目前,气候变化和绿色农业是植物研究的热点领域。然而脱驯化时长对烟草幼苗抗冻性的影响少有报道,现有文献相较于其他类型的研究其论文数量不多,起步较晚,研究植物种类较为集中。试验以烤烟品种K326为研究对象,采用水培法,以4±2℃进行低温驯化、0至48h昼夜温度28±2℃/20±2℃的脱驯化、4±2℃的低温胁迫相结合的方式,通过脱驯化时长筛选试验、脱驯化生长调控试验和较长生长发育期的对比试验三部分,研究脱驯化时长对烟草幼苗抗冻性的影响。主要研究结果如下:(1)农艺性状及生理特性方面:脱驯化时长对烟草幼苗再次进入低温环境时的表型影响较大,适宜时长的脱驯化使得植株能够保持更好的生长状态。但因接触低温环境,其植株生长受到了严重限制,各处理株高、干鲜重、叶长、叶宽、叶面积均低于正常生长处理。但在反映植物抗逆性的相对含水量和相对电导率上存在趋势性变化,适宜时长的脱驯化有助于提高植株抗逆性。(2)反映抗逆性的生理指标方面:试验结果表明,叶绿体色素含量、光合参数、可溶性糖含量及超氧化物歧化酶活性随脱驯化时间呈先升后降的趋势,在12至24 h的脱驯化处理中达到最大值随后下降。与之相反,丙二醛含量、超氧阴离子含量、POD活性随脱驯化时间呈先降低后升高的趋势,并在12 h降至最低。ASA-GSH循环相关物质中APX活性及AsA含量受脱驯化时长影响较大,有随脱驯化时长而逐渐上升的趋势。此外,6 h以上的脱驯化处理对脯氨酸含量影响较小,但是与正常生长处理相比脱驯化处理能够显著影响植株脯氨酸含量。可溶性蛋白含量随脱驯化时长呈现上升趋势,根系活力在各脱驯化的处理中基本保持不变。(3)相关基因相对表达量检测:结果表明,NtNAC、NtbHLH、NtHsp70随脱驯化时长的增加呈现先降低后上升的趋势,以上3个基因在24 h脱驯化的处理中相较于CK均为负反馈调节基因,与正常生长的植株相对表达量水平较为接近。NtCDPK则显示出表达多样性,其表达量的改变对不同脱驯化时长更为敏感,24 h的脱驯化处理使得其表达量上升,其他时长处理的植株表达量相对较低。综上所述,试验结果显示,低温胁迫后适宜时长的脱驯化对植株的生物量影响较小,检测的多个生理指标及相关基因表达均随脱驯化时长的改变而产生了不同的变化趋势,总体上适宜时长的脱驯化对抗冻性有促进作用。在此后的正常发育过程中经历脱驯化的植株各测定指标与正常生长的植株无显著差异。