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动物皮肤毛色(肤色)是最直观的品种特征之一,并且肤色与生长速度以及对疾病的抵抗力等有着直接的关系。在小鼠等其他动物的研究中发现,ASIP是最重要的黑色素调控基因之一,同时也参与脂肪能量代谢、癌症等活动。为了探究ASIP基因在山羊皮肤色素沉着中的作用与机制,本研究以酉州乌羊(全身乌皮)和渝东白山羊(白色皮肤)为试验材料,首先分析两品种间ASIP基因的内含子、外显子序列以及编码区序列差异;利用半定量RT-PCR检测ASIP基因在酉州乌羊和渝东白山羊肌肉、阴阜、唇、脾、大脑、肺、肾、和心的表达差异,并进一步用实时荧光定量PCR检测在酉州乌羊、渝东白山羊和波杂山羊股四头肌ASIP基因mRNA相对表达水平;还测定了股四头肌的肌内脂肪含量。具体结果如下:(1)获得酉州乌羊和渝东白山羊ASIP共21200 bp的基因序列,预测发现了 4个启动子候选区域,分别位于 rs7046-rs7296,rs17973-18223,rs18330-18080,rs7017-rs6767,预测到两个转录起始位点(rs7308和rs6782)。(2)与渝东白山羊相比,酉州乌羊ASIP基因序列上有3个变异位点和1个连续的 3 碱基缺失,分别是 rs16501(c.G>A),rs19643(c.C>A),rs19858(c.C>T)和rs20011-rs20013(delAGG)。所有的变异位点都位于ASIP基因的内含子区域。(3)酉州乌羊和渝东白山羊ASIP基因的CDS区序列均为402 bp且序列完全致。山羊ASIP基因与绵羊、普通牛、水牛、牦牛、猪、骆驼等物种的ASIP基因一致性分别为98%、98%、97%、93%、90%、89%,说明ASIP基因编码区高度保守。(4)ASIP基因mRNA在山羊各组织中均有表达,但表达丰度存在组织特异性。有趣的是,酉州乌羊ASIP基因mRNA水平在心脏中最高,在肌肉中最低,而在渝东白山羊的心脏中ASIP基因表达最低,肾中最高。同时,酉州乌羊各组织ASIP基因相对表达量均极显著低于渝东白山羊(P<0.01)。(5)波杂山羊和渝东白山羊股四头肌中ASIP基因mRNA表达量极显著高于酉州乌羊(P<0.01),但波杂山羊和渝东白山羊之间差异不显著(P>0.05)。股四头肌的肌内脂肪含量变化趋势为波杂山羊>渝东白山羊>酉州乌羊。ASIP基因mRNA表达与IMF值的变化趋势对应。综上所述,酉州乌羊和渝东白山羊ASIP基因可能具有两个转录起始位点;虽然两品种之间ASIP基因CDS序列一致且在物种间高度保守,但在内含子区域发现4个突变。酉州乌羊各组织ASIP基因mRNA相水平均极显著低于渝东白山羊,并且肌肉组织中ASIP基因mRNA表达与IMF值的变化趋势对应。