实验目的:通过针刺内关穴观察异丙肾上腺素诱导心肌肥厚小鼠心率及心肌组织的变化,为针刺治疗肥厚型心肌病提供理论依据。实验方法:选择50只雄性的C57BL6小鼠,体重在20-25g,无任何疾病的清洁级健康小鼠,注射造模药物异丙肾上腺素,方法为连续背部皮下注射14天建立心肌肥厚的动物模型。在实验造模前,分别记录下每只小鼠的正常心率和体重,并且给每只小鼠用耳标器打上不同的标记,以便区分,将小鼠随机分成5组,分别为:正常组、模型组、双侧内关穴针刺组,尾部非穴位针刺组,药物治疗对照组。每组选取10只进行实验。除正常组外,其余4组小鼠均注射造模药物。正常组小鼠每天麻醉后注射(1ml/kg)生理盐水,共14天。模型组每天皮下分三个部位注射造模药物异丙肾上腺素(15mg/kg),共14天。在此基础上,针刺组针刺双侧“内关穴”每天1次,每次留针15分钟。尾部非穴位针刺组针刺小鼠尾根部,每天1次,每次留针15分钟,共14天。药物治疗组小鼠每天灌胃阿替洛尔(10mg/kg)一次,共14天。实验中小鼠选穴的参照标准:参照中国针灸学会实验针灸研究会制定的“实验动物针灸穴位图谱”取内关穴。内关穴定位在前臂掌侧正中线上,腕横纹上1mm。实验结果:1.心率:正常小鼠的心率为(354.22±49.86)次/min,模型组的平均心率为566次/min,药物组与内关针刺组的心率显著降低,平均心率分别为352次/min、365次/min,药物组与内关针刺组的小鼠心率无显著性差异;尾部针刺组的心率没有降低,反而略有增高,没有起到降低心率的作用,与模型组比较基本无效果。2.电镜下正常组结构基本清晰,可见排列规则的肌原纤维,可见成排的形态多呈椭圆形的线粒体,内外膜完整,脊清晰。相比之下,模型组线粒体内外膜不淸晰,脊结构不清。线粒体数量代偿性增多及肿胀,会出现增生的间质胶原纤维。药物治疗组肌节未见损伤。针刺内关组间质中出现少量的胶原纤维增生,血管内皮线粒体轻度肿胀,内皮细胞连续,肌节结构尚可,肌原纤维未见损伤。而尾部非穴位针刺组同倍视野下线粒体增多,溶酶体增多,胶原纤维灶性融合;3.光镜下分别放大100倍和400倍时MASSON染色心肌纤维化的分析:镜下组织间质充斥的胶原纤维被染为蓝色,正常组小鼠显示排列整齐的心肌纤维,形态完整,细胞浆液丰满,胞核饱满,心肌状态正常,未见明显的异常。相比之下,模型组的心肌组织出现代偿性肥大,呈现不连续状态,少数的心肌横纹出现断裂或者是紊乱,间质中布满蓝色的胶原纤维,核固缩明显。药物治疗组及针刺内关组与模型组比较,紊乱的细胞状态明显减轻。4.各组小鼠光镜下分别放大100倍和400倍时HE染色心肌纤维化的分析:正常组可见肌纤维完整,并且排列整齐,细胞核位于肌纤维的中央,心肌和心肌间质未见明显的异常,切开心肌细胞,可见纵切面横纹清晰,胞核居中,横切面为不规则的多角形,可见肌原纤维放射状的排列在核周围。模型组有明显的心肌横纹紊乱,断裂。轻到中度的充血水肿,纤维肿胀,胞核不清。针刺内关组、药物组与模型组相比较,可见心肌细胞无卵和断裂的程度减轻。尾部针刺组与模型组相比,无明显差异。实验结论:1.针刺内关穴组和药物治疗组治疗异丙肾上腺素诱导的心肌肥厚小鼠均有效。2.针刺内关穴组和药物治疗组均可降低异丙肾上腺素诱导心肌肥厚小鼠的心率,二者无显著性差异。3.针刺内关穴可改善异丙肾上腺素诱导心肌肥厚小鼠心肌细胞的超微结构,优于药物治疗组。