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目的:通过多巴胺(DA)表面改性方法将利拉鲁肽(LIR)固定在乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)膜上制备出薄膜载体(LIR-DA-PLGA),进一步验证LIR-DA-PLGA是否可以诱导骨髓间充质干细胞分化为胰岛B样细胞(IBCs)。方法:1.PLGA诱导载体的制备:圆形盖玻片硅化处理后,将PLGA溶液均匀地涂在玻片上,制备成PLGA膜。通过DA表面改性的方式将LIR固定在PLGA膜上制备出诱导载体(称为LIR-DA-PLGA)。同时制备单纯DA表面改性的PLGA膜做为对照(称为DA-PLGA)。2.骨髓间充质干细胞的提取、培养和诱导:从乳大鼠的股骨内提取骨髓,离心后在低糖培养液中贴壁培养至第三代细胞。将细胞接种到LIR-DA-PLGA、DA-PLGA和PLGA三种膜上并在高糖培养液中诱导培养。3.膜的表面性能检测:采用接触角测量仪、傅里叶红外检测仪和扫描电镜对LIR-DA-PLGA、DA-PLGA和PLGA三种膜的表面性能进行检测。4.细胞增殖及生长状态检测:细胞诱导培养的第一天和第三天,通过噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增值情况。并且在诱导培养的第三天,采用异硫氰酸荧光素(FITC)染色方法来观察细胞生长状态。5.相关蛋白和基因表达情况检测:在诱导培养的第7天,采用免疫荧光染色和实时定量聚合酶链锁反应(PCR)的方法检测在LIR-DA-PLGA和DA-PLGA膜上IBCs相关蛋白和基因的表达情况。结果:1.材料表面性能:接触角测量仪、傅里叶红外检测仪和扫描电镜的结果证明LIR-DA-PLGA和DA-PLGA膜已经成功制备。此外,从接触角的结果可以看出:DA改性后膜的接触角减小,亲水性增强;LIR固定后膜的接触角明显减小,亲水性显著增强。2.细胞增殖及生长状态:DA改性后,细胞的增值率明显增高,细胞的生长状态良好。通过DA表面改性方法固定LIR后,细胞增值和生长状态与LIR浓度有关,并且10mL/L和20mL/L LIR-DA-PLGA膜更适合细胞生长。考虑经济成本和药物毒性,本实验选择10mL/L LIR作为LIR的最适浓度并制备了10mL/L LIR-DA-PLGA做为诱导载体。3.IBCs相关蛋白和基因的表达:10mL/L LIR-DA-PLGA膜上细胞的蛋白表达较DA-PLGA膜多,并且10mL/L LIR-DA-PLGA膜上细胞的相对基因表达是DA-PLGA的2倍。结论:1.DA可以促进细胞增值并且可以将LIR固定在PLGA膜上从而制备出LIR-DA-PLGA诱导载体。2.10mL/L LIR-DA-PLGA膜可以促进IBCs增值和诱导并且适合做将BMSCs分化为IBCs的诱导载体。