CdTe和CdTe@ZnS量子点的细胞毒性及其对蛋白质结构的影响

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本文用水相法分别制备出谷胱甘肽(GSH)修饰的CdTe和CdTe@ZnS量子点。通过优化合成及包裹过程中的各种影响因素,包括回流时间、配比浓度、pH条件等,制备出了性质优良的CdTe单核和CdTe@ZnS核壳量子点。通过荧光光谱法将两种量子点分别作用于蛋白质,讨论了其对蛋白质结构的影响,并进行了量子点的细胞毒性、细胞成像实验研究,为量子点在生命领域的安全应用提供了研究依据。通过对CdTe核量子点和CdTe@ZnS核壳量子点进行透射电子显微镜(TEM)、扫描透射电镜(STEM)、选区电子衍射图(SAED)、能谱分析(EDS)、荧光光谱(PL)、圆二色谱(CD)等技术手段表征,检测量子点的形貌、尺寸大小、晶格结构和发光性质。表征结果证明两种量子点都有较稳定的荧光性质,CdTe和CdTe@ZnS量子点平均粒径分别为3.9和4.2nm,粒径分布比较均匀,且二者都属于立方相的闪锌矿结构。以在生理环境下表面带有不同电荷的人血清白蛋白(HSA)和溶菌酶(LYS)为对象,分别探讨了CdTe和CdTe@ZnS量子点对两种蛋白质的结构影响。三维荧光光谱检测显示,CdTe和CdTe@ZnS同时改变了两种蛋白质的三维结构和生物活性。相比之下,由于LYS的正电荷作用,使得量子点对它的影响更大于HSA。而CdTe@ZnS核壳量子点对两种蛋白质的淬灭程度都较小。从圆二色谱的结果表明量子点与蛋白质相互作用会导致蛋白质结构骨架(二级结构中的a-螺旋结构)发生改变,并且使得蛋白质周围环境的疏水性降低。这些结论都说明量子点作用于蛋白质后改变了它的空间构造及其性能,由此导致了毒性的出现。本文系统地研究了不同浓度的CdTe、CdTe@ZnS量子点、CdCl2及GSH对K562细胞存活率的影响。通过细胞毒性实验发现CdTe量子点的细胞毒性很大,而使用包覆了ZnS的CdTe@ZnS核壳结构量子点的细胞毒性则明显减小。此外,通过研究量子点对细胞的形态和荧光成像的影响,观察到绝大多数量子点都位于细胞核附近,只有少数量子点位于细胞质中。CdTe@ZnS量子点注入细胞数小时后,细胞没有明显的形态学变化,而将CdTe量子点注入细胞后,细胞逐渐显示出溶解状态,细胞质变为颗粒状,最后全部溶解。使用水相法制备出CdTe和CdTe@ZnS量子点,通过优化合成条件得到较优的制备方法。分别探讨了两种量子点对HSA和LYS结构的影响,为今后镉系量子点在生物医学领域能否广泛应用提供参考,通过研究发现CdTe@ZnS量子点毒性明显低于CdTe,说明经过包裹钝化的ZnS后的量子点更为安全,在生物医药领域的应用更有潜力。
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