[目的]构建结核性胸腔积液家兔模型,观察水通道蛋白4(AQP4)水通道蛋白5(AQP5)在结核性胸腔积液家兔模型的脏层胸膜和壁层胸膜组织上的动态表达;并通过ELISA法检测家兔模型胸腔积液中干扰素-γ(INF-γ)的浓度,在结核性胸腔积液发病过程观察INF-γ的动态变化;将甲基强的松龙注入胸膜腔内,来探讨甲基强的松龙对结核性胸腔积液中INF-γ浓度及家兔胸膜上AQP4、AQP5表达的影响,以及对结核性胸腔积液的治疗作用。[方法]将42只新西兰大白兔随机分成2组,对照组21只,实验组(甲基强的松龙注射组)21只。将家兔胸膜腔内注射结核分枝杆菌悬液建立结核性胸腔积液家兔模型。造模过程中行胸部B超检查,了解其胸腔积液及粘连、纤维板形成的情况。至家兔模型建立成功后,两组家兔模型在第1、3、5、7、10、15、20天时各抽取胸腔积液1次,且同时每次分别处死动物3只并取家兔胸膜组织;每次抽取积液后将甲基强的松龙注射液(剂量为:1Omg/kg)注入实验组中剩余存活的家兔的胸膜腔内。用ELISA法检测每次抽取胸腔积液中的INF-γ的浓度,并观察其在胸腔积液中的动态变化;使用Western blot检测取下的脏层,壁层胸膜组织中AQP4、AQP5的表达;并同时使用免疫组织化学染色法检测胸膜组织AQP4、AQP5的表达;使用RT-PCR法检测家兔胸膜组织上AQP4基因、AQP5基因mRNA的表达情况。[结果]1.胸腔积液含量变化情况:从对照组中家兔模型的胸腔积液含量可看出随着时间的递增呈现上升的趋势,在到达15天时至最高点,15天后至20天呈现下降的趋势。而在实验组中,可以看出在第10天后家兔模型胸腔积液的含量表现出下降的趋势,在20天时回到与5天时相似的水平。2.胸腔积液中INF-γ浓度变化情况:通过ELISA法检测,对照组中:从第1天到第20天,随着时间增长,胸腔积液中的INF-γ浓度呈现明显的递增趋势;在第20天,家兔模型胸腔积液中的INF-γ浓度达到峰值。实验组:在前7天内,随着时间增长胸腔积液中INF-γ浓度呈现明显的递增趋势;但在第7天到第20天间,胸水中的INF-γ浓度呈现出明显下降,并且第7天到第10天呈现出的下降趋势更为明显。而通过对照组和实验组比较可以看出在前7天内虽然两组中INF-γ的浓度呈持续上升的趋势但实验组每次检测都要比对照组的胸水中的INF-γ浓度低;第10、15、20天,对照组与实验组进行比较,家兔动物模型胸腔积液中INF-γ浓度的差异有统计学意义(p<0.05)。4.胸膜组织上AQP4、AQP5表达情况:通过Western blot方法与免疫组织化学染色法发现,AQP4、AQP5在脏层胸膜细胞的胞浆和细胞核内的表达要比壁层胸膜细胞的胞浆和细胞核内的表达丰富,实验组与对照组对比后,甲基强的松龙的对胸膜组织中AQP4、AQP5的表达有一定的抑制作用。5.胸膜组织上AQP4mRNA、AQP5mRNA的表达情况:通过RT-PCR实验发现,实验组胸膜组织上AQP4mRNA、AQP5mRNA的表达要比对照组胸膜组织上AQP4mRNA、AQP5mRNA的表达程度低。[结论]1.经家兔胸腔内注射结核分枝杆菌悬液能够成功建立家兔结核性胸腔积液模型。2.甲基强的松龙在对结核性胸腔积液的产生过程中有一定的抑制作用。3.AQP4、AQP5在脏层胸膜上的表达要比壁层胸膜丰富4.甲基强的松龙可以对脏层胸膜和壁层胸膜上AQP4、AQP5的表达起到抑制作用。5.甲基强的松龙能够降低胸腔积液中INF-γ的浓度,并在用药的第7天后效果较为明显。