7-脱甲氧基娃儿藤碱对小菜蛾的生物活性及其消化系统的作用研究

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小菜蛾是世界范围内危害十字花科作物的主要昆虫之一。近年来,小菜蛾对我国作物的危害日趋严重。重复使用化学农药防治小菜蛾容易产生抗药性,防治效果下降,解决这种困难的主要途径之一是开发新农药。牛心朴子(Cynanchum komarovii)是一种杀虫植物,其生物碱对小菜蛾有很好的杀虫活性。7-脱甲氧基娃儿藤碱是从牛心朴子中分离出的一种菲并吲哚里西啶生物碱,已经证明这种生物碱对烟草花病毒利白血病细胞等具有很好的抑制和毒杀活性,但关于其杀虫活性至今未见研究报道。为了全面了解该生物碱的生物活性,为新农药研究筛选活性物质,本论文以小菜蛾为目标试虫,研究了7-脱甲氧基娃儿藤碱的杀虫活性,并利用组织病理分析的方法和生理生化检测手段研究它对小菜蛾中肠组织、生长激素利消化酶活力的影响,初步探讨了它的毒杀机理。主要内容及结果如下:1.7-脱甲氧基娃儿藤碱对小菜蛾的生物活性测试用不同的活性测试方法测试了7-脱甲氧基娃儿藤碱对小菜蛾的生物活性。结果发现,7-脱甲氧基娃儿藤碱对小菜蛾3龄幼虫有较好的胃毒活性、生长发育抑制活性和拒食活性。当药液浓度为15.000g/L时,处理24h后的非选择性拒食率达到99.15%;处理48h后的生长发育抑制率达到103.65%,即试虫体重出现负增长;处理7d后的胃毒死亡率为66.67%。2.7-脱甲氧基娃儿藤碱对小菜蛾中肠组织的影响采用组织病理分析的方法研究了7-脱甲氧基娃儿藤碱对小菜蛾中肠组织的影响。发现7-脱甲氧基娃儿藤碱对小菜蛾中肠组织有一定破坏作用。用7-脱甲氧基娃儿藤碱处理的试虫中肠内食物积累较多,中肠壁弯曲、肠壁细胞排列疏松,微杆呈消融状态,杯腔内充塞,杯腔基部微绒毛消失,围食膜明显被破坏,但上皮细胞完好。但观察死亡试虫,其中肠上皮细胞排列凌乱,围食膜完全被破坏。3.7-脱甲氧基娃儿藤碱对小菜蛾体内蜕皮激素含量和几丁质酶活力的影响采用高效液相色谱法和3,5-二硝基水杨酸法测定了7-脱甲氧基娃儿藤碱对小菜蛾体内蜕皮激素和几丁质酶活性影响。结果发现,7-脱甲氧基娃儿藤碱处理试虫24h后蜕皮激素的含量与对照相比减小了28.58%;小菜蛾体内儿丁质酶的活力为1.3927μg/mg pro/min,与对照(15.183μg/mg pro/min)相比明显受到抑制,抑制率达到87.35%。4.7-脱甲氧基娃儿藤碱对小菜蛾体内消化酶活力的影响分别采用3,5-二硝基水杨酸法、福林-酚法和橄榄油乳剂比浊法测定了7-脱甲氧基娃儿藤碱对小菜蛾体内淀粉酶、蛋白酶利脂肪酶活性的影响,采用考马斯亮蓝法测定了酶液中蛋白质含量。研究发现,淀粉酶、蛋白酶利脂肪酶活力明显受到抑制,处理48h后对淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活力的抑制率分别为71.60%、93.38%、89.20%;蛋白质含量为83.8138μg/mL,与对照相比增大了40.60%。
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