乙型脑炎(Japanese encephalitis, JE)是由日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)引起的一种人畜共患病,患者多表现为发热、腹泻、头痛、恶心、意识水平下降、颤抖以及行动异常等,而猪群受感染后表现为明显生殖障碍。靶向中枢神经系统,引发中枢神经系统炎症反应,是乙型脑炎病毒导致人和动物发病、、死亡的主要因素。而小胶质细胞过度激活及其诱导的大量炎症因子分泌,则是JEV引发脑部炎症反应的重要途径。但JEV通过何种信号通路激活小胶质细胞,其分子机制如何等科学问题仍不清楚。本研究首先从TLR3和RIG-Ⅰ信号通路入手,研究了JEV感染小鼠小胶质细胞之后炎症因子的表达、信号通路的激活情况。具体研究内容如下：以小鼠小胶质细胞系BV-2为体外模型,研究了乙型脑炎病毒在该细胞中的增殖情况,发现该病毒可以感染BV-2,但在该细胞中的增殖滴度较低,荧光定量检测C基因拷贝数在48h内增加不超过10倍。经荧光定量PCR与ELISA方法检测,乙型脑炎病毒感染能有效刺激细胞因子、趋化因子如TNF-α、IL-6、CCL-2表达量显著上调；同时,Western Blot检测结果显示TLR3、RIG-Ⅰ蛋白表达量因乙脑病毒刺激表现明显上调,且该病毒刺激能诱导信号通路激酶ERK、p38MAPK磷酸化蛋白及转录因子NF-κB、AP-1的核内表达量均显著上调。通过shRNA转染方法分别对TLR3和RIG-Ⅰ进行干扰,观察干扰后上述指标的变化,发现：ERK、p38MAPK蛋白磷酸化、转录因子NF-κB、AP-1的核内表达以及炎症因子表达均受到了不同程度的抑制,且细胞内病毒含量增加。表明TLR3与RIG-Ⅰ在乙脑病毒诱导小胶质细胞炎症反应与病毒增殖过程中起到了重要作用,且RIG-Ⅰ较TLR3更显著。