乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)是一种生物安全性良好,且已被FDA批准的药用辅料,它作为疫苗传递与佐剂系统,具有诸多优点,并且是非常有利用前景的疫苗佐剂。本论文主要针对DDAB-PLGA作为疫苗佐剂诱导机体免疫增强效果的作用机制进行了研究。具体研究内容包含以下几个方面:(1)纳微球的制备。选用PLGA为材料,卵清蛋白OVA作为模型抗原,分别采用常规的水包油(O/W)复乳法和纳米沉淀法制备不同粒径(100nm和1μm)的DDAB-PLGA纳微球,并对其理化特性进行了表征。结果表示,成功制备了表面光滑,粒径均一,且分散性良好的荷正电的DDAB-PLGA纳微球。(2)纳微球的免疫效果评价。在免疫系统中,纳微球通过调控颗粒性质来调节抗原的释放行为,显著提高了其作为疫苗佐剂的免疫效果。100nm DDAB-PLGA纳米球在增强细胞和体液免疫应答方面具有潜力,而微球则更倾向于体液免疫。100nm DDAB-PLGA纳米球能够诱导更高水平的CTL应答,诱导T细胞向Th1方向极化以及较高水平的记忆性T细胞反应,激发机体强有力的免疫应答。(3)纳微球在动物体内的生物分布。将DDAB-PLGA纳微球与89Zr标记的OVA结合,成功制备的载89Zr-OVA的纳微球进入体内后,参与体内代谢活动,动态分布于脏器或组织,利用PET/CT显像技术有效监控和追踪抗原在体内的转运过程,重点探讨了纳微球疫苗免疫后在体内的生物学行为,尤其是摄取抗原的免疫细胞的淋巴组织归巢能力。(4)纳微球对次级淋巴器官和树突状细胞的影响。纳微球能够诱导更多负载抗原的APC细胞通过被动的淋巴引流进入淋巴结,同时也可由抗原递呈细胞摄取、递呈抗原并转运至淋巴结。纳微球经DCs摄取入胞后,通过溶酶体逃逸到胞质内,显著提高抗原的交叉提呈水平。同时分泌大量的炎性细胞因子,诱导DCs的成熟与活化。(5)纳微球诱导树突状细胞成熟的机制的研究。通过体内体外实验证实p38 MAPK信号通路在DDAB-PLGA纳微球诱导树突状细胞成熟的调控中起着至关重要的作用,且p38信号通路对相关细胞因子表达上调起着传递细胞信号的作用。