研究背景与目的:卵巢癌（Ovarian cancer,OC）是女性生殖系统常见的一种恶性肿瘤,死亡率居于妇科恶性肿瘤之首,早期不易被诊断和发现,大多数患者就诊时已为晚期。目前卵巢癌的基本治疗方法是采用肿瘤细胞减灭术和术后辅助性化疗,紫杉醇联合卡铂静脉化疗是卵巢癌的一线化疗方案,但化疗耐药却严重导致了卵巢癌患者无进展生存期缩短及低生存率。我们认为紫杉醇主要依赖TLR4/MyD88信号通路,引起多种细胞因子释放,炎症微环境促进肿瘤增殖从而产生化疗耐药。有研究发现莱菔子素与MD-2胞外区半胱氨酸残基形成加合物,抑制TLR4/MD-2二聚体形成,从而阻断了TLR4/MyD88信号通路下游NF-KB细胞信号转导及IL-6等促炎细胞因子的分泌。由此我们可推断,莱菔子素可阻断紫杉醇激活TLR4/MyD88信号通路导致的化疗耐药,可能提高卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性,增加肿瘤细胞的凋亡。本研究通过细胞存活率及凋亡检测旨在进一步证实莱菔子素能够增加卵巢癌细胞对紫杉醇敏感性及肿瘤细胞凋亡,以寻找卵巢癌新的治疗药物或化疗的增敏剂,为解决紫杉醇的耐药导致卵巢癌低生存率问题提供新途径,以期提高卵巢癌患者的预后及总体生存率。研究方法:1、结晶紫染色法筛选莱菔子素作用浓度区间,并测定莱菔子素、紫杉醇分别诱导人卵巢癌OVCAR-3和A2780细胞72小时后细胞的存活率;2、结晶紫染色法测定紫杉醇联合莱菔子素对人卵巢癌OVCAR-3和A2780细胞的生长抑制作用,并比较紫杉醇联合莱菔子素与单用紫杉醇的生长抑制作用;3、流式细胞技术检测莱菔子素、紫杉醇及紫杉醇联合莱菔子素分别作用人卵巢癌OVCAR-3和A2780细胞不同时间后细胞凋亡率的分布变化情况,并比较紫杉醇联合莱菔子及紫杉醇单药组的凋亡率变化。研究结果:1、莱菔子素、紫杉醇随着药物浓度的增加,人卵巢癌A2780、OVCAR-3细胞的存活率逐渐降低。莱菔子素作用于A2780、OVCAR-3细胞72小时的IC₂₀值分别为2.231±0.318μmol/L、2.374±0.227μmol/L;IC₅₀值分别为8.780±1.698μmol/L、10.970±1.540μmol/L,比较莱菔子素对两种细胞株IC₅₀值无明显差异（P>0.05）;紫杉醇作用于人卵巢癌A2780、OVCAR-3细胞72小时后IC₂₀值分别为0.0027±0.0001μmol/L、0.0047±0.0005μmol/L;IC₅₀值分别为0.028±0.004μmol/L、0.044±0.004μmol/L,并比较紫杉醇作用两种细胞株的IC₅₀值,结果显示紫杉醇作用卵巢癌A2780细胞IC₅₀值明显低于卵巢癌OVCAR-3细胞IC₅₀值（P<0.05）,说明紫杉醇对卵巢癌A2780细胞的生长抑制作用较OVCAR-3细胞更强。2、在OVCAR-3细胞中,紫杉醇联合莱菔子素(IC₂₀)诱导OVCAR-3细胞72小时后测得紫杉醇IC₅₀值为0.032±0.003μmol/L,联合组较单药紫杉醇组IC₅₀（0.044±0.004μmol/L）有明显降低（P<0.05）,说明了莱菔子素能够明显提高紫杉醇对卵巢癌OVCAR-3细胞的细胞毒作用。在A2780细胞中,紫杉醇联合莱菔子素(IC₂₀)诱导A2780细胞72小时后测得紫杉醇IC₅₀值为0.025±0.004μmol/L,较单药紫杉醇组IC₅₀（0.028±0.004μmol/L）相比无明显差异（P>0.05）,说明了莱菔子素不增加紫杉醇对卵巢癌A2780细胞的细胞毒作用。3、紫杉醇(IC₅₀)作用A2780、OVCAR-3细胞后随时间增加凋亡细胞逐渐增多（P<0.05）,紫杉醇(IC₅₀)作用人卵巢癌A2780细胞15小时、30小时后细胞总凋亡率分别为8.23%、18.44%,紫杉醇(IC₅₀)作用人卵巢癌OVCAR-3细胞15小时、30小时后细胞总凋亡率分别为8.14%、14.27%。并比较紫杉醇(IC₅₀)作用卵巢癌A2780、OVCAR-3两种细胞株不同时间后凋亡率变化,结果显示紫杉醇(IC₅₀)作用卵巢癌A2780、OVCAR-3两种细胞15小时后凋亡率变化无明显差异（P>0.05）,而作用30小时后A2780细胞凋亡率明显高于OVCAR-3细胞凋亡率（P<0.05）,说明紫杉醇对卵巢癌A2780细胞促凋亡作用更强。莱菔子素(IC₂₀)作用于人卵巢癌A2780、OVCAR-3细胞后随时间的增加细胞凋亡率变化较阴性对照组无明显差异（P>0.05）。OVCAR-3细胞中,紫杉醇(IC₅₀)联合莱菔子素(IC₂₀)凋亡率明显大于紫杉醇(IC₅₀)单药组（P<0.05）,而A2780细胞中,紫杉醇联合组与单药组对卵巢癌细胞的促凋亡作用无明显差别（P>0.05）,实验结果说明莱菔子素能够增强紫杉醇对卵巢癌OVCAR-3细胞的促凋亡作用,对A2780细胞无此作用。结论:莱菔子素、紫杉醇对人卵巢癌A2780细胞（MyD88阴性）、OVCAR-3细胞（MyD88阳性）两种细胞株均有剂量依赖性生长抑制及时间依赖性促凋亡作用,且人卵巢癌MyD88阴性细胞株对紫杉醇更敏感。莱菔子素能够明显增加人卵巢癌MyD88阳性细胞紫杉醇的敏感性及促凋亡作用。