目的:建立二甲基甲酰胺(DMF)慢性中毒性肝损伤大鼠模型,观察其病理特点和线粒体凋亡途径相关蛋白在DMF慢性中毒性肝损伤大鼠肝脏组织中的表达。探讨细胞凋亡机制在DMF发病中的作用。方法:⑴建立二甲基甲酰胺慢性中毒性肝损伤大鼠模型:将SD大鼠随机分为2组,每组各8只;DMF肝损伤组:腹腔注射40%DMF溶液1 ml/100g,每周1次;正常对照组:腹腔注射等体积的0.9%氯化钠注射液,每周1次;第8周给药后2天后抽血查肝功能(ALT、AST、ALB),并处死大鼠,进行病理及细胞凋亡相关蛋白检测;⑵肝功生化指标检测:采取全自动生化分析仪检测;⑶肝组织病理学检查:肝组织标本采取10%中性甲醛溶液中固定,常规石蜡包埋,HE及网状纤维染色,显微镜下病理分析;⑷细胞凋亡蛋白检测:采用免疫组织化学染色法检测Bax、Bcl-2、Cyt-c、Caspase-3、Caspase-9线粒体细胞凋亡途径相关蛋白,采用半定量积分法及ImageJ分析的方法对染色结果进行判断和统计分析。结果:⑴大鼠一般情况:与正常对照组相比DMF组大鼠体重减轻,第8周时与对照组相比体重有明显差异(450.2±12.6g vs 312.8±25.9g,t=12.51,p≤0.001);⑵肝功生化:第8周时两组ALT(87.83±28.63 vs 82.00±19.9,t=1.38,p=2.61)、AST(126.12±44.25 vs 122.2±26.88,t=0.35,p=0.77)两组比较差异无统计学意义;ALB:与正常对照组相比DMF组有明显下降(28.03±1.56 vs 27.49±0.71,t=0.89,p=0.03)两组比较差异有统计学意义;⑶肝组织病理学改变:DMF组大鼠肝组织小叶结构尚完整,可见轻度肝细胞水肿,空泡变性,中央静脉周边可见细胞嗜酸性病变及凋亡小体,毛细胆管轻度扩张伴胆汁淤积,网纤染色见窦周纤维化,对照组大鼠肝组织结构正常;⑷细胞凋亡基因表达情况:Bax蛋白DMF组大鼠肝组织高表达,以中央静脉周围的肝细胞表达最突出,对照组呈阴性表达。采用半定量积分法两组计分比较(8.71±0.49 vs 3.50±0.53,t=15.59,p<0.001),差异具有统计学意义。灰度分析法两组阳性染色面积百分比对比(11.40±0.36 vs 3.59±0.17,t=55.11,p<0.001)差异也具有统计学意义;Cyt-c、Caspase-3、Caspase-9蛋白在DMF组大鼠肝组织也呈高表达,而Bcl-2低表达,阳性表达的细胞凋亡蛋白均以中央静脉周围的肝细胞表达最突出,上述蛋白在正常对照组大鼠无表达;⑸凋亡蛋白半定量分析对比:Bax、Cyt-c、Caspase-3、Caspase-9在慢性DMF中毒性肝损伤组均呈高表达,Bcl-2呈低表达,高表达蛋白与低表达蛋白Bcl-2相比差异具有统计学意义(p<0.001)。结论:⑴线粒体细胞凋亡途径相关蛋白Bax、Cyt-c、Caspase-3和Caspase-9在大鼠二甲基甲酰胺慢性中毒性肝损伤肝组织中均呈高表达,而Bcl-2呈低表达;⑵细胞凋亡是二甲基甲酰胺慢性中毒性肝损伤常见的一种病理改变,这种病理改变以中央静脉周围的肝细胞最为显著。