论文部分内容阅读
目的：1.研究鞘氨醇激酶-1(sphingosine kinase-1，SphK1)在胃癌裸鼠移植瘤生长时血管生成中的作用;2.探讨其在血管生成中的作用机制，从而为胃癌新的靶向治疗提供理论基础。 方法：将体外培养的人胃癌细胞SGC-7901于对数期生长期，调整细胞浓度后注射至裸鼠皮下，建立人胃癌裸鼠移植瘤模型，建模成功后根据肿瘤大小将荷瘤裸小鼠随机分为4组，每组8只，分别予以腹腔注射生理盐水(normal saline，NS)、神经鞘氨醇激酶抑制剂（sphingosine kinase inhibitorⅡ，SKI-Ⅱ）、顺铂(cisplatin，DDP)、SKI-Ⅱ联合DDP进行干预治疗，1次/周，共3周;每隔3天测一次肿瘤大小，绘制肿瘤生长曲线，计算抑瘤率及观察治疗前后荷瘤裸鼠体重的变化;在治疗结束后全部脱颈处死荷瘤裸鼠，取下瘤体组织:Western Blot法检测瘤体中SphK1、VEGF的表达;免疫组化方法检测瘤体SphK1、VEGF和CD34的表达情况及计算瘤体内微血管密度（microvessel density，MVD），检测抑制肿瘤血管生成情况。取下肝脏组织，HE染色观察干预治疗的毒性作用。 结果： 1.成功构建人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型。 2.肿瘤生长抑制曲线显示:与对照组相比，3组治疗组均有抑制肿瘤生长作用，SKI-Ⅱ组、DDP组抑瘤率分别是:48.69±1.39％、75.24±1.19％;其中以SKI-Ⅱ联合DDP组抑瘤作用最为明显，抑瘤率达90.25±1.53％，各组抑瘤率之间差异具有统计学意义（P＜0.05）。 3.免疫组化结果示:与NS组相比，SKI-Ⅱ及SKI-Ⅱ联合DDP可显著下调肿瘤SphK1、VEGF蛋白的表达(P＜0.05)，减少瘤体内的MVD差异具有统计学意义(P＜0.05)，单用DDP对SphK1、VEGF的表达及瘤体内MVD差异无统计学意义(P＞0.05)。经Pearson相关分析，瘤体组织SphK1与VEGF的表达呈正相关(r=0.968，P＜0.01)。瘤体组织MVD计数与VEGF表达呈正相关(r=0.862，P＜0.01)。 4.Western Blot结果显示:与NS组相比，SKI-Ⅱ及SKI-Ⅱ联合DDP组不同程度下调SphK1和VEGF的表达，与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)，单用DDP对SphK1、VEGF的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。 5.各干预治疗组肝脏病理HE染色未见明显差异。 结论： SphK1对实验动物瘤体的生长、血管生成具有促进作用，通过SKI-Ⅱ下调SphK1的表达后，其可能的机制是通过SphK1/1-磷酸鞘氨醇(sphingo sine-1-phosphate，S1P)信号途径，有效抑制VEGF蛋白的表达减少肿瘤血管生成，这可能是抑制裸鼠胃癌移植瘤生长的途径之一，为胃癌新的综合治疗提供实验依据。