加纳链霉菌生长特性及黄霉素发酵工艺的研究

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黄霉素(flavomycin)是由加纳链霉菌(Streptomyces ghanaensis)等产生的一种磷酸糖脂类抗生素,通常被用作动物饲料添加剂。本文对加纳链霉菌生长特性及移种标准、产黄霉素发酵条件、补料工艺及发酵培养基的优化进行了研究。对加纳链霉菌种子培养工艺、生长特性及移种标准进行研究,确定斜面接种标准为平板单菌落接种第一代斜面,菌龄8 d;种子摇瓶培养的最佳培养条件为采用具挡板摇瓶、温度34℃、pH7.0;液体种子移种标准为菌浓35%~41%,pH值二次回落6.9~7.0,还原糖28.8~30 g/L,氨态氮二次回落1.05~2.57 mg/L,种龄44~48 h。使用最佳培养工艺及移种标准,黄霉素的相对效价提高35.28%,不同批次间的效价差异低于7%。对黄霉素发酵条件进行优化,考察了发酵温度、摇床转速、种龄、装液量、初始pH、接种量,通过单因素试验、Plackett-Burman试验及Box-Behnken试验确定了黄霉素最佳的发酵条件:温度36℃、pH7.2、种龄 45 h、装液量 50/250 mL、接种量 8%、转速 240 r/min,黄霉素的相对效价提高63.42%。对黄霉素发酵补料工艺的研究,确定补加玉米浆,降低发酵培养基中基础豆油,补加豆油,比不补料提高51.92%,最终在5 L发酵罐上放大。对黄霉素发酵培养基配方进行优化,如碳源、氮源、无机盐、表面活性剂等,通过单因素试验、Plackett-Burman试验及Box-Behnken试验,得到影响黄霉素发酵效价的三个重要因素:黄豆饼粉、玉米粉以及CaC03,最终确定黄霉素最佳发酵培养基,黄霉素发酵效价较优化前提高60.53%。
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