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本研究利用华南农业大学以日本晴为受体转化药用野生稻抗逆相关TAC克隆获得的栽培稻材料,包括:1、转化随机TAC克隆获得的高世代（T10）TDF系列稳定株系和低世代（T3-T5）TR系列材料;2、转化基于DREB保守序列筛选的TAC克隆高世代（T10）D系列稳定株系;3、分别转化基于NBS-LRR、STK和NAC保守序列筛选的TAC克隆获得的低世代（T3-T5）NBS-LRR系列材料、STK系列材料和NAC系列材料;通过转化株系目标TAC克隆的分子标记鉴定、稻瘟病菌株抗性鉴定和抗性遗传分析,以期明确转化株系的稻瘟病抗性水平与抗性遗传基础,为进一步挖掘利用药用野生稻抗性基因,培育抗瘟水稻品种奠定基础。主要研究结果如下:人工接种D系列叶瘟鉴定30个D系列株系对55个菌株均有抗性,其中有14个广抗谱株系,抗性水平较高,抗谱比例为65.4%86.7%,占鉴定总株数的46.67%,16个中抗谱株系,抗谱比例为42.6%63%;人工穗瘟接种26个D系列株系,8个株系抗谱范围广,抗谱比例为66.7%85.7%,抗穗瘟能力强,4个中抗谱材料的抗谱比例为40.0%60.0%,D40株系抗穗瘟能力最弱。选取14个经鉴定抗病性强的D系列株系经田间病圃自然诱发,6个株系抗叶瘟表现02级。13个株系抗穗瘟表现02级,其中D4-2×LTH表现高抗穗瘟,抗病等级为0级。15个TDF系列株系对55个菌株均有抗性,其中6个广抗谱株系,抗叶瘟能力强,9个中抗谱材料,占总鉴定株数的65.67%,但TDF12株系较弱;TDF株系对穗瘟接种的菌株抗性存在差异,其中7个株系对GD09-3全抗病,5个株系对HB6全抗病;对GW3、FJ3和SH4表现为部分抗病,抗/总株数≥0.71。NBS-LRR系列株系对接种的8个菌株抗叶瘟性存在差异,其中有112个株系对HB1菌株抗性最强,抗病平均等级≤1级,83个株系对GD09-12菌株表现出较高抗性,对GW6、HB5、HB6、jj01-1和FJ10菌株表现出抗瘟性,抗/总株系数≤0.75。STK系列对GW6、GW3、HB4、FJ10菌株表现高抗叶瘟性,抗/总株数比范围:0.540.83,但对jj01-1菌株没有抗叶瘟性,均表现为感病。NAC系列株系对GW6和GD09-12菌株的抗叶瘟性较强,抗/总株系数>0.79,对HB8、HB4和HB6菌株有一定的抗性,接种HB5、jj01-1、HB1和FJ10菌株感病株系较多,抗/总株系数较小。利用TAC载体携带的HPT和SacB抗性标记基因对30个D系列和12个TDF系列进行抗性检测,均能扩增出目标TAC载体携带的目的基因条带。35个T3代NBS-LRR系列株系,有16个株系扩增出目的条带;100个T4代株系,有92个株系材料扩增目的条带;筛选出74个株系纯合株系,182个T5代株系,有170个株系扩增出目的条带,筛选出159个纯合株系。76个T3代STK系列株系,有15个株系扩增出目的条带;45个T4株系,有37个株系扩增出目的条带,纯合株系有11个;54个T5代株系,45个株系扩增出目的条带,筛选出39个纯合株系。38个T3代NAC系列株系,有13个株系扩增出目的条带;45个T4代株系,均能扩增出目的条带,纯合株系有45个;36个T5代株系,34个株系扩增出目的条带,筛选出31个纯合株系,表明5个选用基于转录因子保守序列筛选的药用野生稻TAC克隆转化水稻株系,从T3至T5代筛选出的纯合抗病株系逐渐增加,T5代基本上达到纯合,均表现出较好的抗病能力,并且抗性趋于稳定,鉴定出目的基因数量逐渐增加,DREB、STK、NBS-LRR和NAC类转录因子分别成功转入这几个转基因株系中,可能作为正向调控因子参与转基因株系的广谱抗病效应,促进其抗稻瘟病能力显著增强。筛选高世代稳定抗病转基因株系D1、D4-1、D4-2和D38与LTH配组鉴定F2。以HB5菌株接种D1×LTH和D4-1×LTH、以HB8菌株接种D4-1×LTH和D4-2×LTH,对叶瘟的抗感分离比符合3:1,表明D1、D4-1和D4-2对上述菌株的叶瘟抗性受1对显性基因或显性QTL位点控制;以HB8接种D1×LTH,对叶瘟的抗感分离比符合15:1,表明D1对HB8菌株的叶瘟抗性受2对显性基因控制;以HB5菌株接种D4-2×LTH,抗感分离比符合13:3;以HB5和HB8菌株分别接种D38×LTH,抗感分离比均符合9:7;这表明D4-2对HB5菌株、D38对HB5和HB8菌株的叶瘟抗性均与两对互作基因控制有关。以HB5菌株和HB8菌株接种D1×LTH、D4-1×LTH、D4-2×LTH和D38×LTH,穗瘟的抗感分离比符合3:1,表明D1、D4-1和D4-2和D38对上述菌株的叶瘟抗性受1对显性基因或显性QTL位点控制。D1×LTH、D4-2×LTH和D38×LTH均能特异性扩增目标TAC克隆HPT目的基因条带,抗感分离比符合9:7,但L4-1×LTH无理想的抗感分离比,表明D1×LTH、D4-2×LTH和D38×LTH抗病性可能被2对相补的基因控制。