利用RAPD分子标记对罗汉果(Siraitia grosvenorii)种质资源的遗传分析和鉴定

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罗汉果[Siraitia grosvenorii(Swingle)C.Jeffrey ex Lu et Z.Y.Zhang]为葫芦科罗汉果属的植物,是广西的著名特产,具有重要的医疗和保健价值。本研究利用RAPD分子标记技术,对15份罗汉果种质材料(包括10个栽培品种和5份野生种质)进行了遗传分析和鉴定,研究结果表明: 1.用改良的SDS法能够提取浓度和纯度都较高的罗汉果基因组DNA,且经RAPD扩增后能取得比较理想的扩增效果。 2.优化了RAPD反应体系,确定了适合于罗汉果RAPD-PCR的反应体系:25μl反应体系,其中含超纯水17.8μl,10×Ex Taq Buffer 2.5μl(含20mmol/L Mg2+),2mmol/L dNTP 2.5μl,10 μmol/L随机引物1μl,Ex Taq DNA聚合酶0.2μl(1U),模板DNA1μl(50ng/反应)。确定了适合的PCR扩增程序为:94℃预变性4min;94℃变性30sec,37℃退火30sec,72℃延伸1min,共35个循环;72℃延伸7min。反应产物4℃保存。 3.RAPD聚类结果表明,圆果类栽培品种间亲缘关系较近,而长果类栽培品种与圆果类栽培品种间的亲缘关系较远,却与一些野生种质的亲缘关系相对较近。在圆果类中青皮果、柑子果和马铃果亲缘关系较近,聚为一类;白毛果、红毛果、柏林二号和茶山果亲缘关系较近,又聚为一类;长果类中拉江果和冬瓜果遗传距离较近,而长滩果与这两者的遗传距离较远。
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