目的:通过脂多糖建立小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型,研究通管丸含药血清对TLR2通路上相关转接蛋白TRAF-6及PPAR-γ/NF-κB通路中PPAR-γ蛋白,进一步证实通管丸通过抑制TLR2/My D88/NF-κB信号通路活化,并上调PPAR-γ,从而达到对输卵管炎性阻塞性不孕的治疗作用。方法:1.取雌性健康大鼠10只,随机分为实验组5只和对照组5只,实验组予通管丸高剂量混悬液灌胃,对照组予等量生理盐水灌胃,均灌胃3天后采血以制备血清,分别为含药血清组和无药血清组。2.将RAW264.7随机分为9个组,正常培养组(巨噬细胞RAW264.7),无药血清组(5%、10%、20%、40%浓度),含药血清组(5%、10%、20%、40%浓度),用CCK8法测定最佳含药血清浓度为10%。3.将RAW264.7随机分为正常对照组和LPS模型组,LPS模型组以含100ng/ml LPS进行诱导,正常对照组未作处理,24小时后观察其形态,并采用ELISA法检测TNF-α、IL-1B,以确定造模成功。4.将造模成功后的小鼠巨噬细胞随机分为B、C、D、E共4组,与空白对照组A组相比较,分组如下:A组:空白对照组(正常巨噬细胞+10%胎牛血清);B组:无药血清组(10%无药血清);C组:PPAR-γ激动剂组(20umol/L吡格列酮);D组:NF-κB阻断剂组(20umol/L NF-κB阻断剂SN50);E组:含药血清组(10%含药血清);5.最后通过Western Blot法检测PPAR-γ、TRAF-6蛋白的表达。结果:1.根据增值率计算公式,10%的含药血清浓度的巨噬细胞增殖率明显高于其他8组(正常培养组、无药血清组5%、无药血清组20%、无药血清组40%浓度、含药血清组5%、含药血清组20%、含药血清组40%浓度),其增值率为118.3%。2.LPS模型组的巨噬细胞形态呈不规则形状,伴有大量伪足,且细胞内有大量空泡;LPS模型组中TNF-α、IL-1B的表达较正常对照组相比明显上升,有统计学意义(P<0.05)。3.在α=0.05的检验水平下,空白对照A组、无药血清B组、PPAR-γ激动剂C组、NF-κB阻断剂D组、含药血清E组之间均有差异(P<0.05)。其中PPAR-γ蛋白在各组中表达如下:A>C>E>D>B(P<0.05);TRAF-6蛋白在各组中表达如下:B>D>E>C>A(P<0.05)。结论:1.10%血药浓度为最佳含药浓度。2.用100ng/ml脂多糖成功建立小鼠巨噬细胞炎症模型。3.含药血清能上调PPAR-γ及降低TLR2通路上关键接头蛋白TRAF-6的表达,从而抑制NF-κB转录,而达到抗炎作用;其抗炎作用强于NF-κB阻断剂,稍弱于PPAR-γ激动剂。