水产品中红霉素残留量高效液相色谱测定方法的研究

来源 :上海水产大学 上海海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:BeginJava123
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红霉素(Erythromycin)是大环内脂类抗生素,主要应用于治疗由革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌引起的疾病,近年来,它在养殖业,包括水生生物中也得到应用。由于该药物在生物体内的代谢时间较长,因此容易产生残留。 本文建立了一种相对简单、可靠、灵敏度较高的水产品中红霉素残留量的高效液相色谱方法,并对红霉素的稳定性进行了探讨。 通过优化试验,本文确定了水产品中红霉素测定的前处理方法,即采用乙腈提取,正己烷去脂,柠檬酸盐进行萃取、磺酸阳离子小柱进行固相萃取,然后用二氯甲烷进行反相萃取。最后采用9-芴代甲氧基酰氯进行柱前衍生反应,生成红霉素的衍生物。 确立了高效液相色谱测定的条件:色谱柱,CAPCELL PAK MG Ⅱ-C<,18>柱(4.6mm×150mm);流动相采用乙腈和磷酸盐缓冲溶液(pH6.3)的梯度;荧光检测器(激发波长为255nm,发射波长为315nm);柱温,40℃;进样量:50μL;流速:2mL/min;定量方法采用内标法。以南美白对虾、罗非鱼和鳗鲡为研究材料,采用罗红霉素为内标物进行HPLC测定,得到最小检测浓度为200μg/kg,回收率>70%,批内精密度和批间精密度均小于10%。 本文对测定过程中红霉素的分解进行了初步探讨。结果发现:红霉素在酸性条件下不稳定,并随着酸度的增大,红霉素的分解也随之增加。通过高效液相色谱和液质联用技术对红霉素在酸性条件下的分解产物进行了鉴定,发现红霉素主要的分解产物为红霉素A8,9-脱水-6,9半缩酮。
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