【摘 要】
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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)是由镰刀菌侵染小麦等谷物后产生的一种真菌毒素,属于B族单端孢霉烯族毒素。DON具有极高的细胞毒性,可以结合核糖体,抑制多肽合成,是
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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)是由镰刀菌侵染小麦等谷物后产生的一种真菌毒素,属于B族单端孢霉烯族毒素。DON具有极高的细胞毒性,可以结合核糖体,抑制多肽合成,是毒性较大的真菌毒素之一。人或动物过量摄入被DON污染的食物后,轻则恶心、呕吐,重则直接死亡,因此被DON污染的粮食和饲料失去了食用价值,造成大量的经济损失。本研究以实验室菌种库为待测菌株,以DON为底物,筛选获得DON降解菌,探索不同条件对DON降解率的影响,并对其降解产物进行初步研究。以下是主要的研究结果:为了获得大量的DON用于脱毒研究,本研究以大米作为产毒培养基,采用液液萃取分离结合HPLC纯化的方法,开发了一种操作简单、经济高效的DON分离纯化方法,该方法能够在不使用柱层析条件下获得纯度大于80%的DON,经过制备液相纯化能够直接获得DON纯品,利用该方法从每千克大米培养物中获得61.4 mg DON纯品。对实验室保存的145株菌进行三轮筛选并综合比较筛选结果,选取降解率最高的HN-117菌株作为后续研究对象。在筛选条件下,HN-117对DON的降解率为19.7±1.3%;HN-117初期菌落表面光滑,呈淡黄色,形状规则,后期表面出现褶皱,形状逐渐不规则;利用16S rDNA法鉴定HN-117为枯草芽孢杆菌。系统研究了HN-117对DON降解动态过程、最适降解温度、最适降解浓度,结果表明HN-117在含有DON的培养基中连续培养四天对DON的降解率最高;培养温度为30℃时最有利于HN-117降解DON;在最适降解条件下,HN-117对较低浓度的DON(浓度低于100μg/mL)降解率为29.5%~44.5%,对较高浓度DON(浓度高于100μg/mL)的降解率为25.1%~29.5%。探索了DON代谢产物M-DON的制备方法,成功获得M-DON纯品,利用UPLC-qTof-MS和~1H-NMR对该物质进行分子结构鉴定。结果证明M-DON为DON同分异构体,构型变化的分子机制为DON C2、C11之间的醚键与C12、C13之间的醚键发生断裂重排。
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