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黄曲霉毒素B1（AFB1）是由黄曲霉、寄生曲霉等产生的真菌毒素,广泛存在于发霉的原料和饲料中。AFB1能诱发原发性肝癌、免疫抑制以及机体氧化应激。但是,以AFB1首先接触的消化道作为研究对象的研究较少,且报道不一。目前有关硒拮抗AFB1对机体的危害也越来越引起人们的关注。本实验室前期研究表明肉鸡摄食含AFB1的日粮可致空肠细胞G2/M期阻滞,而日粮中添加亚硒酸钠可以保护这一损伤。但有关AFB1对雏鸡空肠黏膜细胞周期阻滞以及硒对其拮抗作用的分子机理还未见相关的研究报道。本研究以亚硒酸钠作为硒源饲喂摄食AFB1的肉雏鸡,用组织病理学、免疫组织化学、流式细胞术和实时荧光定量PCR等方法,研究空肠组织形态结构变化,细胞周期及G2/M期相关调控因子的动态变化。试验选用240只1日龄科宝肉鸡健雏,随机分为4组,每组60只,分别饲喂对照组（硒的正常含量为0.332mg/kg）日粮、AFB1组（0.6 mg/kg AFB1）日粮、+Se组（在对照组日粮中添加亚硒酸钠为硒源的0.4mg/kg硒）日粮、AFB1+Se组（在AFB1组日粮中添加以亚硒酸钠为硒源的0.4mg/kg硒）日粮共21天。其结果如下:组织病理学检测结果表明,AFB1组中肠绒毛尖部黏膜上皮细胞脱落,绒毛高度和绒毛/隐窝比值均显著或极显著低于对照组、+ Se组和AFB1+ Se组（p<0.01或p<0.05）;与对照组相比,+Se组和AFB1 +Se组的空肠则无明显的组织学损伤变化。流式细胞术检测结果显示,在7日龄时,AFB1组G0/G1期细胞数量百分比显著低于AFB1+Se组（p<0.05）,而在21日龄时,则显著低于对照组（p<0.05）。在7、14和21日龄时,AFB1组G2/M期细胞数量百分比均分别显著或极显著高于其它三个组（p<0.01或P<0.05）;而+Se组、AFB1+ Se组G2/M期细胞百分比与对照组间无明显差异（p>0.05）。免疫组化检测结果显示,在7、14和21日龄时,AFB1组中p53和p21的积分光密度值均分别显著高于其它三个组（p<0.01）,而+Se组则与对照组无明显差异（p>0.05）。在整个试验中,AFB1组中的p-cdc25C、CyclinB和PCNA积分光密度值均显著或极显著低于对照组、+Se组和AFB1+Se组（p<0.01或p<0.05）,而+Se组则与对照组无明显差异性（p>0.05）。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,AFBt组中的ATM、Chk2、p53和p21 mRNA表达量在整个试验中均显著或极显著增加（p<0.01或p<0.05）;而Cdc25、Cyclin B3、Cdc2、Mdm2和PCNAmRNA表达量,除了第7日龄的Cdc25和14日龄的Cdc2mRNA表达量无明显变化外,其余在整个试验中显著或极显著降低（p<0.01或p<0.05）。与AFB1+Se组比较,AFB1组中ATMmRNA表达量在第14、21日龄显著或极显著增加（p<0.01或p<0.05）,Chk2、p53和p21mRNA表达量在整个试验中显著或极显著增加（p<0.01或p<0.05）,Cdc25、CyclinB3mRNA表达量在第21日龄显著或极显著降低（p<0.01或p<0.05）,Cdc2mRNA表达量在第7日龄显著降低（p<0.05）,Mdm2mRNA表达量在第7、14和21日龄显著或极显著降低（p<0.01或p<0.05）,PCNAmRNA表达量在第14、21 日龄显著性降低（p<0.01）。此外,+Se组中ATM、Chk2、p53、p21、Cdc25、Cdc2、CyclinB3、Mdm2和PCNAmRNA表达量较对照组无显著性变化（p>0.05）。综上所述,日粮中0.6mg/kgAFB1可阻碍雏鸡空肠黏膜发育,G2/M期阻滞,ATM、p53、p21、Chk2 mRNA 或蛋白表达上调,Cdc25、Cdc2、Cyclin B、Mdm2 和 PCNA mRNA或蛋白表达下调,而饲料中添加0.4 mg/kg硒可缓解这些变化。说明AFB1可能通过激活ATM-Chk2-Cdc25-Cyclin B/cdc2 和 ATM-Chk2-p53 信号通路导致空肠黏膜细胞 G2/M 期阻滞,而硒能抑制AFB1对上述两条通路的激活,这可能是AFB1对雏鸡空肠黏膜细胞G2/M期阻滞以及硒对其拮抗作用的分子机理。