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老年斑是由脂褐素沉积于皮肤表面所形成的特殊的老年色素性皮肤病。老年斑是人体老化的重要标志,也是皮肤老化的显著特征,严重影响着人体的面部美容和机体健康。丰富的天然抗氧化物质不仅具有提高机体免疫力、维护机体健康的作用,更具有抗氧化与美容祛斑的功能。通过在体外构建抗老年斑化学模型,筛选出抗老年斑较强的抗氧化物质,为研发美白抗斑产品提供新的思路和方法,对促进美白抗斑产业的发展具有重要的现实意义。本课题在体外构建了老年斑模型,并利用该模型筛选了具有体外抗老年斑的天然抗氧化剂,且进行了天然抗氧化剂抑制酪氨酸酶活性的试验,筛选效果较优的天然抗氧化剂,主要研究结果如下:(1)在体外构建老年斑模型。以血清白蛋白和丙二醛发生羰-氨交联反应生成荧光性物质为基础,模型最适条件是在pH为7.0的0.1 mol/L的磷酸缓冲溶液中加入24nmol/mL的丙二醛(MDA)和400μg/mL的血清白蛋白,37℃孵育24 h。方法学验证表明,所构建的体外老年斑模型重现性和精确度良好。(2)研究了多种天然抗氧化剂在体外清除老年斑的效果。依据所建立的老年斑模型,芦丁、花青素、原花青素和茶多酚体外清除老年斑能力较强,其半抑制浓度(IC50)分别为28.93μg/mL、30.01μg/mL、32.02μg/mL、59.24μg/mL。枸杞多糖、L-谷胱甘肽、白藜芦醇、姜黄素、Vc,β-熊果苷等由于作用机制不同,在体外对老年斑没有清除作用。(3)优化了多种天然抗氧化剂对酪氨酸酶活性的抑制体系。最佳的工艺条件为:在pH为6.8、0.1 mol/L的磷酸缓冲溶液体系中加入100 U/mL酪氨酸酶,30℃水浴10min。方法学验证表明,所优化的对酪氨酸酶活性的抑制体系的重现性和精确度良好。(4)研究了多种天然抗氧化剂对酪氨酸酶活性的抑制能力。结果表明:对酪氨酸酶抑制能力大小分别为光甘草定>姜黄素>白藜芦醇>VC>曲酸>L-GSH等,其IC50分别为6.8μg/mL、37.5μg/mL、39.1μg/mL、58.6μg/mL、88.5μg/mL、91.3μg/mL。枸杞多糖等由于作用机制不同,对酪氨酸酶活性无抑制作用。(5)天然抗氧化剂的复合作用。原花青素、花青素对老年斑有良好的清除作用,对酪氨酸酶活性也有较好的抑制作用。以不同比例的原花青素、花青素进行复合配比,研究其对老年斑的清除效果,结果显示为加和作用。