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中药前胡为伞形科植物白花前胡Peucedanum praeruptorum Dunn的干燥根,性微寒,味苦,辛;能降气化痰,散风清热;用于治疗风热咳嗽痰多,痰热喘满,咯痰黄稠。前胡药材不但被《中华人民共和国药典》收载外,而且前胡也收录于陕西、甘肃及四川等地方标准。2020版《中国药典》规定,前胡中白花前胡甲素含量不能低于0.9%,白花前胡乙素含量不能低于0.24%[1]。目前,市售前胡名称多样,有前胡、硬前胡和毛前胡等。这些前胡类药材质量参差不齐,性状特征和含量指标不符合《中国药典》标准的情况屡见不鲜,这对企业验收,药材、饮片管控和临床治疗效果造成了巨大影响。根据作者实地调查分析,认为造成前胡质量差异的重要原因是前胡药材基原不清。如《甘肃省中药材标准》(2008年)收载了(少毛北前胡)硬前胡Peucedanum harrysmithii Fedd.exWolff var.subglabrum(Shan et.Sheh)Shan et.Sheh的根为硬前胡,《四川省地方标准》(2010年)收载了短片藁本Ligusticum brachylobum Franch的根为毛前胡,甚至部分市售所谓的前胡,既不是前胡也不是毛前胡或硬前胡。为了彻底理清市售前胡的基原及前胡、毛前胡和硬前胡的质量差异,本研究收集了国内各大药材市场的前胡药材,利用性状鉴定、显微鉴定和分子鉴定等多种鉴定方法明确前胡来源,利用高效液相检测了前胡样品中白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量,综合分析市售前胡质量不合格的原因,初步建立了快速鉴定前胡药材真、伪、优、劣的方法,为解决市售前胡质量参差不齐的问题提供科学依据和鉴定方法,也为药材市场上具有类似问题的中药材或中药饮片鉴定或质量评价提供参考。首先对收集的103批前胡样品进行性状与微性状鉴定,初步判断前胡的种类;利用HPLC化学图谱,结合DNA分子鉴定方法(包括分析ITS2序列和预测二级结构)对鉴定结果再鉴定,准确确定前胡基原;然后对样品含量测定,探析不同基原前胡与白花前胡的差异;最后利用体视显微镜和色度仪对前胡粉末颜色、木质部与韧皮部比例和断面油点统计和定量分析,探讨不同前胡样品粉末颜色、木质部大小、断面油点与前胡药材质量的相关性。具体研究结果如下:1.对103批市售前胡进行性状鉴定和分子鉴定,结果表明:市售前胡的基原有七种:白花前胡(正品)、石防风、短叶藁本、硬前胡、当归、珊瑚菜和光前胡。除正品前胡之外,主要基原为石防风与短叶藁本;在103批样品中,有61批前胡为正品白花前胡,占总数的59.2%,这与课题组前期市场调查和资料调研的结果基本吻合;在前胡掺伪样品中,白花前胡样品中掺入硬前胡,硬前胡样品中掺入短叶藁本,部分批次中掺伪量还较高(如样品32掺伪量为23.5%)。对收集的103批前胡样品含量测定,61批白花前胡中有26批含量未达到药典规定,占比为42.6%;35批达到药典规定要求,占比为57.4%;伪品为硬前胡的9批样品有5批达到药典规定要求;伪品为短叶藁本的13批样品有7批达到药典规定要求,其中白花甲素含量远高于药典标准;伪品为光前胡的8批样品中有2批达到药典规定要求,白花前胡甲素与白花前胡乙素含量均低于药典规定标准;伪品为石防风的9批样品中有2批达到药典规定。通过掺伪统计与含量分析发现:掺伪对前胡含量影响明显,伪品硬前胡与短叶藁本的掺入提高整批前胡中白花前胡甲素含量,使原本白花前胡甲素未达标的样品变为达标;光前胡的掺入降低整批次前胡中白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量;石防风的掺入会降低整批次白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量,质量合格的前胡样品可能因光前胡、石防风,当归的掺入使得整个样品批次的质量下降,甚至不合格。2.通过对103批市售前胡的木质部比例统计分析,结果表明:前胡木质部比例分布在3个范围,分别为57.6%-68.2%、38.9%-53.4%和66.4%-75.2%,其中白花前胡主要分布在57.6%-68.2%和38.9%-53.4%两个范围,且木质部比例在57.6%-68.2%中的白花前胡质量好。对前胡粉末颜色统计分析表明:前胡质量优劣与粉末颜色虽然无明显的相关性,但依据粉末颜色可区分白花前胡与短叶藁本和硬前胡;硬前胡与短叶藁本粉末为黑棕色,白花前胡粉末为黄色,有掺伪的前胡粉末为深黄色,因此可依据药材粉末颜色差异可辅助鉴定白花前胡与短叶藁本和硬前胡。通过对前胡油点数量与质量的相关性研究表明,白花前胡的油点数量越多,质量越好。3.根据ITS2测序结果构建系统发育树,确定分子鉴定结果,样品S102,S101,S96,S71,S70,S66,S14,S10 与光前胡聚为 1 支,S7,S28,S34,S39,S41,S42,S62,S98,S99,S12 与短叶藁本聚为一支,S5,S23,S25,S40,S44,S47,S56,S89,S97与石防风聚为一支,S78与当归聚为一支,S75,S79与珊瑚菜聚为一支,其余样品与白花前胡聚为一支。由此确定,103批前胡市售样品的基原主要为以下7种:白花前胡(正品)、石防风、毛前胡(短叶藁本)、硬前胡(少毛北前胡)、当归、珊瑚菜和光前胡;除正品前胡外,主要基原为石防风和短叶藁本。基于K2P模型计算前胡与其易混品的K2P距离,其种内遗传非常稳定,种间K2P最小遗传距离0.0592,远远大于前胡的种内最大遗传距离,表明ITS2能够准确区分前胡及其易混品。变异位点分析表明:可通过位点碱基差异鉴别白花前胡与其伪品。白花前胡与硬前胡能在66、109和225位点处鉴别;白花前胡与石防风能够在29、109、138、217和225位点处鉴别,白花前胡与光前胡在能够在23、24和206位点鉴别,白花前胡与短叶藁本能够在7,86,103,159位点鉴别。且通过ITS2的预测二级结构可将7种物种有效鉴定。