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目的:探讨榆干离褶伞溶栓酶对脂多糖诱导的血管内皮细胞炎性损伤的保护作用。方法:以脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)建立体外血管内皮细胞炎症模型。将HUVEC分为空白对照组、模型组和榆干离褶伞溶栓酶(Lyophyllum ulmarium fibrinolytic enzyme,LUFE)低、中、高剂量组。采用MTT法测定HUVEC存活率、酶联免疫吸附法(Enzyme-linked imnuinosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液 LDH、TNF-α、IL-6、MCP-1、E-Selectin 水平,采用 Hoechst染色法观察HUVEC与单核细胞黏附率。采用流式细胞术检测HUVEC的细胞间黏附分子-1(Intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)水平。蛋白免疫印迹法测定 HUVEC 的 Toll样受体 4(Toll-like receptor 4,TLR4),丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK),核转录因子-κB(Nuclearfactor-κB,NF-κB)通路主要蛋白的表达和活化情况。结果:1.榆干离褶伞溶栓酶在0～32μg/mL质量浓度范围内对HUVEC存活率无显著影响(P>0.05)。2.LPS浓度在0～400μg/mL时对HUVEC存活率无显著影响;但LPS浓度在1～100μg/mL时,HUVEC上清液LDH活性显著升高。3与空白对照组相比,模型组的TNF-α、1L-6、MCP-1、E-Selectin水平明显增加(P<0.01);与模型组相比,LUFE各剂量组的TNF-α、1L-6、E-Selectin水平明显降低(P<0.05),LUFE中、高剂量组的MCP-1水平降低(P<0.05)。4.与空白对照组相比,模型组HUVEC的ICAM-1水平和HUVEC与THP-1的黏附率显著升高(P<0.01);与模型组相比,LUFE各剂量组HUVEC的ICAM-1水平和HUVEC与THP-1黏附率明显降低(P<0.01)。5.与空白对照组相比,模型组的TLR4、MyD88、p-TAK1/TAK1、p-JNK/JNK、p-p38/p38、p-NF-κB(p-p65)/NF-κB 水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,LUFE 各剂量组 TLR4、MyD88、p-TAK1/TAK1、p-JNK/JNK、p-p38/p38、p-NF-κB(p-p65)/NF-κB水平显著降低(P<0.05)。6.与模型组比较,NG25(TAK1抑制剂)组、LUFE组、NG25+LUFE联合干预组的TNF-α、MCP-1、ICAM-1水平均明显降低(P<0.05);p-TAK1/TAK1、p-p38/p38、p-NF-κB(p-p65)/NF-κB 水平显著降低(P<0.05);与NG25组比较,NG25+LUFE联合干预组的MCP-1、ICAM-1水平和p-TAK1/TAK1、p-p38/p38、p-NF-κB(p-p65)/NF-κB 蛋白水平降低(P<0.05)。结论:LUFE对血管内皮细胞的炎性损伤具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制TLR4/MyD88/TAK1/NF-κB信号通路及MAPK通路,进而降低炎症因子水平,从而保护血管内皮细胞。