【摘 要】
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由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc)引起的香蕉枯萎病(Fusarium wilt)严重威胁着香蕉种植业的发展。该病原菌从宿主根部的创口部位开始入侵,并在维管组织中定殖和分泌毒素堵塞维管,宿主不能正常进行物质的吸收运输,最终枯萎死亡。目前对该病害的防治手段主要有选育抗病品种、化学药物防控、生物防控等,但是取得的效果都不理想。转录因子FTF(
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由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc)引起的香蕉枯萎病(Fusarium wilt)严重威胁着香蕉种植业的发展。该病原菌从宿主根部的创口部位开始入侵,并在维管组织中定殖和分泌毒素堵塞维管,宿主不能正常进行物质的吸收运输,最终枯萎死亡。目前对该病害的防治手段主要有选育抗病品种、化学药物防控、生物防控等,但是取得的效果都不理想。转录因子FTF(Fusarium transcription factor)与尖孢镰刀菌的致病力密切相关,但是其调控机制尚不清楚。本研究主要通过以下两个方面对其调控Foc TR4的致病机制进行研究:1.通过蛋白质组学结合生物信息学手段预测转录因子FTF1的下游靶标蛋白:构建FTF1过表达菌株,并在离体条件下用液体察氏培养基模拟病原菌在植物体内的状态,诱导菌株大量分泌蛋白;之后,采用非标记定量蛋白质组学技术(Label-free)鉴定分泌蛋白以及对鉴定结果进行生物信息学分析,共筛选到74个受FTF1调控的候选效应蛋白,其中有27个受FTF1直接调控。2.构建FTF1基因的敲除突变株:在香蕉尖孢镰刀菌中,FTF1基因呈现多拷贝状态,传统的基因敲除手段无法构建其敲除突变株。本研究建立了CRISPR/Cas9系统,为FTF1基因的敲除打下基础。本研究对转录因子FTF1的功能进行了初步研究,为下一步阐明FTF1调控Foc TR4的致病机制提供理论依据,为香蕉枯萎病的防治提供新思路。
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