海洋真菌Schizochytrium sp.发酵产DHA油脂的代谢调控研究

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二十二碳六烯酸(DHA)是一种重要的ω-3多不饱和脂肪酸,具有降血脂、增强视力、促进脑细胞发育等生理功效,广泛用于食品医药行业。海洋真菌裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)是商业化生产DHA的理想菌种,研究其发酵产DHA油脂的调控具有重要意义。本文对Schizochytrium sp.DP-16发酵产DHA油脂过程中的氮源调控和群体感应效应进行了研究。裂殖壶菌发酵产DHA油脂的氮源调控研究结果表明,氮源对细胞生长、油脂积累、油脂脂肪酸中DHA比例均产生重要影响。谷氨酸钠有利于细胞的生长,而酵母浸粉有利于油脂合成。与单一有机氮源相比,10 g/L谷氨酸钠和10 g/L酵母浸粉的复配氮源大大提高了生物量、油脂产量和DHA百分含量,发酵96 h分别达到55.83 g/L、19.50 g/L和35.68%,而无机氮源的添加则对细胞生长和油脂产量产生不同程度的抑制。发酵时间进程研究表明,培养基中碳源充足而氮源耗尽引发裂殖壶菌胞内油脂积累的启动。油脂积累调控关键酶——苹果酸酶和异柠檬酸脱氢酶活力变化分析,为阐明裂殖壶菌DHA油脂积累的氮源调控机制提供了依据。对Schizochytrium sp.DP-16发酵产DHA油脂过程中群体感应进行研究,将40 h培养液上清中加入培养16 h菌体,继续培养8 h后测得其生物量、油脂产量和油脂含量比对照组分别提高了 12.10%、83.30%和63.55%;分别利用二氯甲烷、三氯甲烷和乙酸乙酯对40 h菌体培养液上清进行萃取和GC-MS分析,推测培养液上清中存在的群体感应信号分子可能为邻苯二甲酸二异丁酯和4-甲基-5-(β-羟乙基)噻唑。将两种物质分别添加至16 h发酵液中,并监测其发酵进程,发现邻苯二甲酸二异丁酯实验组的油脂含量始终高于对照组,而4-甲基-5-(β-羟乙基)噻唑实验组与对照组结果相差不大。本研究结果初步表明Schizochytrium sp.DP-16发酵产DHA油脂过程中存在群体感应效应,培养液上清中存在群体感应效应信号分子——邻苯二甲酸二异丁酯。
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