奈必洛尔是第三代β₁受体阻滞剂,因其治疗高血压效果显著而具有广阔的应用前景。该药于1997年在德国首次上市,1998年在英国上市,并于2007年由美国食品药品监督管理局（FDA）批准应用于轻中度高血压的治疗。奈必洛尔在国内尚处于临床前研究阶段,虽然目前有一些实验数据证实其有效性及安全性,但距离上市还有较大的距离。奈必洛尔分子中有4个手性中心,临床用药是将其（R,S,S,S）-对映体和（S,R,R,R）-对映体等量混合而成。目前,奈必洛尔最重要的一条工业化合成路线是杨森公司开发的色满酸合成法。该方法中6-氟-3,4-二氢-2H-1-苯并吡喃-2-甲酸是一个关键手性中间体,对其进行手性拆分和纯度控制是一个难点。国内外现有手性拆分方法主要集中在手性试剂化学反应法上,但所用手性试剂或价格昂贵,或毒性较大。目前,尚未见到有色谱法的拆分报道。本研究分别采用制备型的液相色谱和超临界流体色谱来对该手性中间体进行制备拆分考察,建立起的拆分方案可满足临床前研究需求。本研究主要实验内容如下:1.建立起分析型高效液相色谱分离方案。通过手性固定相和流动相筛选实验,确立了最佳固定相/流动相组合;考察了实验中改性剂比例、流速、柱温等参数对于分离的影响,确立了实验条件。测试实验的稳定性、重复性及载样量等内容,确定分离方案。运行此方案,对映体分离度为3.50。2.建立起制备型液相色谱法拆分方案。结合线性放大理论,将分析色谱参数放大计算得到制备色谱理论参数;根据仪器设备条件,对该参数进行优化调整;考察柱径、粒径、进样方式等内容,确定了制备方案。以此方案拆分了10克样品,分离效率为108g/d,产品光学纯度98.5%以上,总收率为87.0%。3.建立起分析型超临界流体色谱分离方案。通过手性固定相和流动相筛选实验,确定了最佳组合;实验中考察了改性剂比例、流速、柱温、背压等参数对分离的影响,确立了实验条件。运行分离实验,测试重复性、稳定性和载样量等内容,确定分离方案。在此条件下,对映体分离度为4.20。4.建立起制备型超临界流体色谱法拆分方案。将分析色谱参数依据线性放大及等密度理论放大,结合分离仪器条件对参数进行优化,确定了制备方案。实验中考察了柱径、粒径、进样方式、效率最大化等内容。以此方法考察了20克样品的拆分,制备效率为166g/d,产品光学纯度98.0%以上,总收率88.0%。