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第一部分移植胚胎数目对体外受精-胚胎移植治疗临床结果的影响
目的:回顾性比较分析移植胚胎数目对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的临床数据,探讨移植胚胎个数对IVF-ET治疗结局的影响。
方法:6493新鲜胚胎移植患者根据移植胚胎的个数分成3组,A组:移植1个胚胎,B组:移植2个胚胎,C组:移植3个胚胎。比较三组的基本情况:年龄、不孕年数、ICSI比例、IVF次数和取卵当天的子宫内膜厚度;比较三组的实验室情况:平均获卵数、平均受精胚胎数、平均有效胚胎数和平均冷冻胚胎数;比较了三组的临床结果:临床妊娠率及单胎、双胎和三胎在临床妊娠中所占的比例,流产率,异位妊娠率,分娩率及分娩时早产和足月产的情况,还比较了分娩时单胎、双胎和三胎所占的比例。单胎妊娠患者的临床数据进一步分析,1735例单胎妊娠也根据移植胚胎的个数分成3组,A组:移植1个胚胎,B组:移植2个胚胎,C组:移植3个胚胎,比较三组的分娩结局:极早产、早产、平均出生孕周;比较了三组流产结局;比较了三组出生儿的情况:极低体重儿、低体重儿和平均出生体重。
结果:卵裂期新鲜胚胎移植6493例,临床妊娠率38.5%,其中双胎占28.2%,三胎占2.3%;活胎分娩率30.2%,其中双胎占28.4%,三胎占0.3%。比较三组一般情况,B组的患者年龄较轻,反复IVF次数较少,在ICSI比例和HCG日子宫内膜厚度三组均无明显差异。在实验室数据可见移植1枚胚胎这组患者获卵数、受精胚胎数、可用胚胎数和冷冻胚胎数较另外两组均明显降低,患者移植1枚胚胎是因为有效胚胎少,未进行选择性单胚胎移植。B组和C组在实验室数据比较没有明显差异。临床妊娠率A组明显低于B组和C组(21.1%比40.1%,37.6%),双胎率也明显降低(1.1%比28.8%,31.6%)。三组在流产率和异位妊娠率方面没有差异。分娩结局同样是A组比B组和C组明显降低(15.6%比31.7%,29.0%),其中A组双胎分娩占1.5%,B组双胎分娩占26.3%,C组占31.4%。另外C组的早产率比另外两组要高。进一步比较单胎妊娠结局三组临床结局,早产率随着移植胚胎个数增加而升高,但无统计学差异,三组流产方面没有差异,在出生体重随着移植胚胎个数增加而略有下降,极低体重儿和低体重儿比例有增加。
结论:非选择性卵裂期单胚胎移植比双胚胎或三个胚胎移植的临床妊娠率下降,活产率下降,但是多胎妊娠率明显降低。双胚胎移植与三个胚胎移植临床妊娠和活产率相似,双胎率和三胎率低。单胎妊娠者随着移植胚胎数目增加早产率和低出生体重儿率增加,出生体重降低。囊胚移植可以提高临床妊娠率和活产率。单囊胚移植比双囊胚移植临床成功率低,但与双卵裂期胚胎移植临床成功率相似。所以如何有效获得优质囊胚从而单囊胚移植对体外受精-胚胎移植临床结局的影响值得重视。
第二部分TGF-β1影响囊胚形成的研究
目的:观察在胚胎体外培养系统中加入转换生长因子-β1(TGF-β1)胚胎从卵裂期胚胎发育形成囊胚的比例和质量,探讨TGF-β1在体外对人胚胎发育及胚胎种植的影响及最适合的浓度。
方法:收集未达到移植和冷冻标准的第三天卵裂期胚胎,以常规培养液培养囊胚作为对照组,在额外添加10ng/mlTGF-β1的培养液中进行体外培养,观察胚胎发育情况,早期囊胚和扩张囊胚的形成率。对不同浓度的TGF-β1对胚胎发育情况、早期囊胚形成率和扩张囊胚形成率比较,探讨合适的TGF-β1浓度。通过对囊胚培养液进行无创染色体筛查(NICS)进行遗传学检测分析TGF-β1添加对囊胚质量的影响。
结果:一共356例患者体外受精-胚胎移植和胚胎冷冻后的1726个D3废弃胚胎进一步培养至第5-6天,囊胚率和有效囊胚率为24.3%和15.4%。10mg/mlTGF-β1组与对照组比较,培养48小时早期囊胚形成率和培养72小时扩展囊胚的形成率分别为:55.05%比32.20%和21.38%比13.80%,均有显著性提高。TGF-β15ng/ml组、TGF-β110ng/ml组和TGF-β140ng/ml组早期囊胚和扩张囊胚形成率分别为:38.42%、55.33%、15.50%和24.28%、32.02%、10.00%。TGF-β1浓度为10ng/ml是早期囊胚和扩展囊胚形成率最高,最有利于后期胚胎发育。同时发现TGF-β140ng/ml组有明显胚胎发育抑制现象,尤其是在早期囊胚囊腔形成上尤其明显。用NICS方法比较发现两组囊胚的染色体正常比例相似。
结论:10ng/ml的TGF-β1加入体外培养液中可以改善人囊胚的形成率和囊胚的质量。5ng/ml的TGF-β1加入体外培养液中与未加入TGF-β1的对照组囊胚形成率和优秀囊胚率相似。40ng/ml的TGF-β1加入体外培养液中可以抑制人囊胚的形成率和囊胚的质量。通过实验数据得出,接近母胎界面生理浓度的10ng/ml的TGF-?1在增加囊胚形成和优质囊胚形成是最合适的浓度。
第三部分TGF-?1与妊娠丢失的相关性研究
目的:通过对妊娠丢失患者者蜕膜组织中TGF-β1的检测,探讨TGF-β1在妊娠丢失中所起的作用。
方法:15名超声提示宫内胎儿发育停止的患者为实验组,15名同期人工流产患者为对照组。采用免疫组织化学法和实时荧光定量PCR(RealtTime-PCR)检测蜕膜中TGF-β1的分布和表达情况
结果:免疫组化显示TGF-β1主要表达于蜕膜的腺体细胞和间质细胞。妊娠丢失组的TGF-β1mRNA的的表达量显著低于正常对照组。
结论:妊娠丢失患者的子宫蜕膜中TGF-β1的表达明显降低,TGF-β1缺失会增加流产,外源性添加TGF-β1改善流产现象。TGF-β1是通过母胎界面的免疫微环境起作用。
目的:回顾性比较分析移植胚胎数目对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的临床数据,探讨移植胚胎个数对IVF-ET治疗结局的影响。
方法:6493新鲜胚胎移植患者根据移植胚胎的个数分成3组,A组:移植1个胚胎,B组:移植2个胚胎,C组:移植3个胚胎。比较三组的基本情况:年龄、不孕年数、ICSI比例、IVF次数和取卵当天的子宫内膜厚度;比较三组的实验室情况:平均获卵数、平均受精胚胎数、平均有效胚胎数和平均冷冻胚胎数;比较了三组的临床结果:临床妊娠率及单胎、双胎和三胎在临床妊娠中所占的比例,流产率,异位妊娠率,分娩率及分娩时早产和足月产的情况,还比较了分娩时单胎、双胎和三胎所占的比例。单胎妊娠患者的临床数据进一步分析,1735例单胎妊娠也根据移植胚胎的个数分成3组,A组:移植1个胚胎,B组:移植2个胚胎,C组:移植3个胚胎,比较三组的分娩结局:极早产、早产、平均出生孕周;比较了三组流产结局;比较了三组出生儿的情况:极低体重儿、低体重儿和平均出生体重。
结果:卵裂期新鲜胚胎移植6493例,临床妊娠率38.5%,其中双胎占28.2%,三胎占2.3%;活胎分娩率30.2%,其中双胎占28.4%,三胎占0.3%。比较三组一般情况,B组的患者年龄较轻,反复IVF次数较少,在ICSI比例和HCG日子宫内膜厚度三组均无明显差异。在实验室数据可见移植1枚胚胎这组患者获卵数、受精胚胎数、可用胚胎数和冷冻胚胎数较另外两组均明显降低,患者移植1枚胚胎是因为有效胚胎少,未进行选择性单胚胎移植。B组和C组在实验室数据比较没有明显差异。临床妊娠率A组明显低于B组和C组(21.1%比40.1%,37.6%),双胎率也明显降低(1.1%比28.8%,31.6%)。三组在流产率和异位妊娠率方面没有差异。分娩结局同样是A组比B组和C组明显降低(15.6%比31.7%,29.0%),其中A组双胎分娩占1.5%,B组双胎分娩占26.3%,C组占31.4%。另外C组的早产率比另外两组要高。进一步比较单胎妊娠结局三组临床结局,早产率随着移植胚胎个数增加而升高,但无统计学差异,三组流产方面没有差异,在出生体重随着移植胚胎个数增加而略有下降,极低体重儿和低体重儿比例有增加。
结论:非选择性卵裂期单胚胎移植比双胚胎或三个胚胎移植的临床妊娠率下降,活产率下降,但是多胎妊娠率明显降低。双胚胎移植与三个胚胎移植临床妊娠和活产率相似,双胎率和三胎率低。单胎妊娠者随着移植胚胎数目增加早产率和低出生体重儿率增加,出生体重降低。囊胚移植可以提高临床妊娠率和活产率。单囊胚移植比双囊胚移植临床成功率低,但与双卵裂期胚胎移植临床成功率相似。所以如何有效获得优质囊胚从而单囊胚移植对体外受精-胚胎移植临床结局的影响值得重视。
第二部分TGF-β1影响囊胚形成的研究
目的:观察在胚胎体外培养系统中加入转换生长因子-β1(TGF-β1)胚胎从卵裂期胚胎发育形成囊胚的比例和质量,探讨TGF-β1在体外对人胚胎发育及胚胎种植的影响及最适合的浓度。
方法:收集未达到移植和冷冻标准的第三天卵裂期胚胎,以常规培养液培养囊胚作为对照组,在额外添加10ng/mlTGF-β1的培养液中进行体外培养,观察胚胎发育情况,早期囊胚和扩张囊胚的形成率。对不同浓度的TGF-β1对胚胎发育情况、早期囊胚形成率和扩张囊胚形成率比较,探讨合适的TGF-β1浓度。通过对囊胚培养液进行无创染色体筛查(NICS)进行遗传学检测分析TGF-β1添加对囊胚质量的影响。
结果:一共356例患者体外受精-胚胎移植和胚胎冷冻后的1726个D3废弃胚胎进一步培养至第5-6天,囊胚率和有效囊胚率为24.3%和15.4%。10mg/mlTGF-β1组与对照组比较,培养48小时早期囊胚形成率和培养72小时扩展囊胚的形成率分别为:55.05%比32.20%和21.38%比13.80%,均有显著性提高。TGF-β15ng/ml组、TGF-β110ng/ml组和TGF-β140ng/ml组早期囊胚和扩张囊胚形成率分别为:38.42%、55.33%、15.50%和24.28%、32.02%、10.00%。TGF-β1浓度为10ng/ml是早期囊胚和扩展囊胚形成率最高,最有利于后期胚胎发育。同时发现TGF-β140ng/ml组有明显胚胎发育抑制现象,尤其是在早期囊胚囊腔形成上尤其明显。用NICS方法比较发现两组囊胚的染色体正常比例相似。
结论:10ng/ml的TGF-β1加入体外培养液中可以改善人囊胚的形成率和囊胚的质量。5ng/ml的TGF-β1加入体外培养液中与未加入TGF-β1的对照组囊胚形成率和优秀囊胚率相似。40ng/ml的TGF-β1加入体外培养液中可以抑制人囊胚的形成率和囊胚的质量。通过实验数据得出,接近母胎界面生理浓度的10ng/ml的TGF-?1在增加囊胚形成和优质囊胚形成是最合适的浓度。
第三部分TGF-?1与妊娠丢失的相关性研究
目的:通过对妊娠丢失患者者蜕膜组织中TGF-β1的检测,探讨TGF-β1在妊娠丢失中所起的作用。
方法:15名超声提示宫内胎儿发育停止的患者为实验组,15名同期人工流产患者为对照组。采用免疫组织化学法和实时荧光定量PCR(RealtTime-PCR)检测蜕膜中TGF-β1的分布和表达情况
结果:免疫组化显示TGF-β1主要表达于蜕膜的腺体细胞和间质细胞。妊娠丢失组的TGF-β1mRNA的的表达量显著低于正常对照组。
结论:妊娠丢失患者的子宫蜕膜中TGF-β1的表达明显降低,TGF-β1缺失会增加流产,外源性添加TGF-β1改善流产现象。TGF-β1是通过母胎界面的免疫微环境起作用。