目的 增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是孔源性视网膜脱离的主要并发症,它的主要特征是在玻璃体内和视网膜前、后表面形成瘢痕样的纤维细胞增生膜。这种增生膜的形成主要包括细胞的增生和细胞外基质(ECM)的沉积。其确切的发病机制还不十分清楚。 组织型转谷氨酰胺酶(tTG)能催化ECM蛋白之间形成抗蛋白酶水解的交联,在ECM的沉积和瘢痕形成过程中起重要作用。目前对于tTG在PVR的发病过程中是否发挥作用还不清楚。因此,本研究检测PVR视网膜前膜中和在PVR形成过程中起关键性作用的视网膜色素上皮(RPE)细胞中tTG的表达情况,探讨tTG是否参与了PVR的发病过程,为进一步明确PVR的发病机制和寻找更为有效的治疗方法提供理论依据。 方法 1.材料来源:收集孔源性视网膜脱离合并PVR患者的视网膜前表面增生膜21例,8例为C级,13例为D级。取死亡12h以内、角膜移植术后的正常供体眼球6例,采用胰蛋白酶消化法,获得人RPE细胞进行原代及传代培养。抽取PVR患者的玻璃体液15例和角膜移植术后供体眼球的正常玻璃体液6例。单克隆鼠抗人tTG抗体和免疫组化超敏SP试剂盒等购自福州迈新生物技术开发公司。 2.tTG的检测:PVR视网膜前膜固定后常规制作石蜡切片,先行HE染色,结构完整者行免疫组织化学染色。培养3～5代的人RPE细胞接种于盖玻片表面并平均分为3组,分别用含有10%PVR玻璃体液、正常玻璃体液和PBS的DMEM培养液培养3组细胞,固定后行免疫细胞化学染色。光