清热、活血、补肾及其合方抑制人卵巢癌细胞SKOV3 PLC-γ1、PKCα和mtp53蛋白表达的研究

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kingsword001
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目的:通过观察清热、活血、补肾及其合方抑制人卵巢癌细胞SKOV3PLC-γ1、PKCα和mtp53蛋白的表达,研究清热、活血、补肾及其合方治疗卵巢癌的作用机理,探讨热毒、血瘀、肾虚与卵巢癌病变的关系。 方法:本实验以SKOV3细胞为实验对象,用MTT法从候选中药中筛选出抑制卵巢癌细胞生长最好的中药,在用正交实验又选出最佳组方,用该方处理SKOV3细胞,在倒置显微镜下观察SKOV3细胞形态的改变;用Westernblot检测对SKOV3细胞PLC-γ1、PKCα和mtp53蛋白表达的影响。 结果:1.从164味中药中筛选出抑制率大于37%的6种药物,应用正交表设计实验优选出最佳组方,再设对照组、清热组、活血组、补肾组及合方组处理细胞,清热、活血、补肾及其合方均能抑制SKOV3细胞生长,影响其形态特征。显微镜下观察清热组细胞皱缩,呈长条形,细胞间隙加大;活血组细胞表面粗糙,胞质内充满颗粒状或空泡样物质,细胞碎片少;补肾组细胞可见细胞皱缩,透光度减小,形态不规则,贴壁性变差;合方组为前三组相兼形态表现,细胞表面粗糙,皿中有较多的细胞碎片。2.清热、活血、补肾及其合方均能抑制SKOV3细胞生长,且合方组作用最强。各组随药物浓度的增加,抑制率逐渐增强,呈量效依赖关系。3.Westernblot分析发现,与对照组相比,当用IC50药物剂量处理细胞时,清热、活血、补肾及其合方均能下调PLC-γ1、PKCα和mtp53蛋白表达,其作用强弱依次为:合方组>清热组>活血组>补肾组。v结论:1.清热、活血、补肾及其合方均能抑制SKOV3细胞的生长,合方组疗效最明显,表明清热、活血、补肾药配伍具有协同作用。2.清热、活血、补肾及其合方通过下调PLC-γ1、PKCα和mtp53蛋白表达水平来抑制卵巢癌细胞增殖。3.通过药效反证,在卵巢癌病变中,热毒、血瘀、肾虚与PLC-γ1、PKCα和mtp53蛋白表达增强密切相关。
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