论文部分内容阅读
本课题旨在对鸭常见致病菌大肠杆菌、里默氏杆菌开展超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测及耐药性调查,并研究解决产ESBLs菌株感染的有效药物治疗措施。2006年3月至2007年6月间,我实验室依据CLSI推荐的ESBLs表型初筛、确证的试验方法对对国内7个省份临床分离的鸭大肠杆菌32株、鸭里默氏杆菌16株进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测。并用二倍稀释法(MIC值法)及K-B纸片法检测临床分离菌株的多种药物敏感性,依据联合用药原则解决鸭产ESBLs致病菌株的耐药性,通过药物敏感性筛选联合用药方案,初选后测定累积浓度抑菌曲线及联合抗菌指数(FIC)进行药物增效研究,选择对产ESBLs和非产ESBLs鸭致病菌敏感的联合药物组合并进行药物新制剂研究。试验结果表明,通过实验室全自动微生物鉴定系统(VITEK-32)鉴定出32株鸭大肠杆菌,通过生化反应鉴定出鸭里默氏杆菌16株,其中有7株鸭大肠杆菌产ESBLs,未检测到产ESBLs鸭里默氏杆菌,大肠杆菌ESBLs阳性检出率为21.87%。产ESBLs菌株对常用头孢三代及半合成青霉素类药物的敏感率低于42.9%,对阿莫西林、氨苄西林耐药率高达100%。产酶菌株和非产酶菌株对新型头孢四代产品头孢吡肟及碳青霉烯类药物亚胺培南、美罗培南的敏感率高于96%。加β-内酰胺酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素复合制剂的敏感性普遍高于未加酶抑制剂的单方制剂,表明加酶抑制剂能够部分解决此类耐药性问题。产ESBLs鸭大肠杆菌存在严重多重耐药现象,主要表现为同时耐三代头孢、氨基糖苷类、氟喹诺酮类药物,如耐头孢曲松、头孢噻肟、头孢噻呋的产ESBLs菌株同时也对环丙沙星、恩诺沙星、庆大霉素、小诺米星、阿米卡星具有高耐药性。抗菌活性研究表明β-内酰胺类抗生素与非β-内酰胺类抗生素联用能明显提高ESBLs菌株对药物的敏感性,联用效果较为突出的是头孢三代头孢曲松联用氟喹诺酮类药物加替沙星,二者2:1配比组合对产ESBLs菌株的敏感率高达85.7%,对非产ESBLs菌株敏感率则达92%;83.61%的非产ESBLs菌株FIC<0.5,85.71%的产ESBLs菌株FIC<0.5,联合用药累积-浓度抑菌曲线百分率明显左移,尤其是对产ESBLs菌株的左移明显;联合用药组合对产ESBLs菌株的MIC50、MIC90比原药分别降低3.25、3.4倍和1.11、3.33倍。表明此联合用药组合对产ESBLs菌株和非ESBLs菌株呈现高敏,可用于治疗鸭产ESBLs菌株的临床感染。运用β-CD药物包合技术进行新制剂研究目的是解决加替沙星原药水溶性低、适口性差和物理稳定性差、光敏性高等应用限制缺点。本课题采取饱合水溶液法(共沉淀法)制备GAT-β-CD包合物,运用正交试验设计优化合包合工艺,并采取相溶溶解度法、扫描量热法和X射线衍射法三种方法时行包合物验证;运用直接溶解度测定法和稳定性加速试验考察包合物的增溶效果和稳定性改良情况。结果表明,GAT-β-CD包合物的最佳包合条件是GAT与β-CD分子比1:3、包合温度为60℃、包合时间为60分钟,包合率可高达80%左右;包合物中GAT的溶解度明显增加,平均比原药增加13.44倍;加速试验3个月后包合物中GAT有效成份含量平均仍在82.72%以上,无明显变色、结块现象,而未包合的GAT有效成份含量平均仅在45.39%左右,下降了近50%,且有明显变色、结块现象。结论显示产ESBLs鸭大肠杆菌存在多重耐药现象,β-内酰胺酶抑制剂能部分解决其对β-内酰胺类抗生素的耐药性,但不能解决多重耐药现象,而联合使用不同种抗生素是解决此类多重耐药现象的主要有效措施之一,其中氟喹诺酮类药物GAT联合三代头孢—CRO是最佳用药组合。β-CD包物包合技术可以有效解决兽药原料的水溶性低、苦味大、稳定性差等应用限制,是研制兽药可溶性粉制剂的重要保障措施之一。